[发明专利]六堡茶中儿茶素类物质和生物碱的定性方法

说明书

本发明公开了六堡茶中儿茶素类物质和生物碱的定性方法，属于茶叶成分测定的技术领域，利用该测定方法能够准确测定六堡茶中是否含有儿茶素类物质和生物碱，该测定方法的抗干扰性较好、专属性强；包括如下步骤：(1)取儿茶素类物质和生物碱对照品经溶解稀释后得到对照品稀释液；(2)取对照品稀释液使用液相质谱联用仪测定，建立对比质谱图数据库；(3)取待测定六堡茶样品浸泡过滤，离心后取提取液，稀释过滤得待测定样品稀释液；(4)取待测定样品稀释液使用液相质谱联用仪测定得待测定样品图谱，将待测定样品与对比质谱图数据库中数据匹配后得到测定结果。

技术领域

本发明涉及茶叶成分测定的技术领域，更具体地说，尤其涉及六堡茶中儿茶素类物质和生物碱的定性方法。

背景技术

六堡茶为黑茶的一种，在延缓衰老、抗菌、抗氧化方面有一定功效。六堡茶泡出的茶汤中富含儿茶素类物质，儿茶素类物质为黄烷醇的衍生物，其化合物为无色结晶形固体，该类物质能溶于水，其水溶液受热或在无机酸存在下，容易产生聚合形成无定形鞣质。儿茶素类物质和生物碱同属茶叶中的两大重要机能性成分。儿茶素类物质包括没食子酸、表没食子酸儿茶素、儿茶素、表儿茶素、表没食子儿茶素没食子酸酯和表儿茶素没食子酸酯。

儿茶素类物质是天然的油脂抗氧化剂，抗氧化活性比维他命E高，并且可以清除人体产生的自由基，以保护细胞膜的作用，进而有延缓衰老的功效，其生物活性作用也受到了广泛的关注。六堡茶作为黑茶的功能成分，儿茶素类物质和生物碱在这些功效中发挥着至关重要的作用。一般会使用的液相方法测对该类物质作定性，这种测定方法需要使用标准物质对色谱峰保留时间进行定性，在茶叶复杂基质中分离目标峰与杂质峰难度较大。如没食子酸在液相测定中保留较差，测定中容易受到与其共流出的物质干扰，在对这些共流出物与目标物分离会耗费较长的时间，由于被测样品基质有一定区别，使用液相法时需先对被测样品进行一定预实验后，确定梯度方法才能正式开展检测。操作过程复杂，抗干扰性不好。因此，亟待发明一种能有效对六堡茶中儿茶素类物质和生物碱的定性方法，以测定出六堡茶中是否含有儿茶素类物质和生物碱。

发明内容

本发明的目的在于提供六堡茶中儿茶素类物质和生物碱的定性方法，利用该测定方法能够准确测定六堡茶中是否含有儿茶素类物质和生物碱，该测定方法的抗干扰性较好、专属性强。

本发明的技术方案如下：

六堡茶中儿茶素类物质和生物碱的定性方法，包括如下步骤：

(1)取儿茶素类物质和生物碱对照品经溶解稀释后得到对照品稀释液；

(2)取步(1)所得对照品稀释液使用液相质谱联用仪测定，建立对比质谱图数据库；

(3)取待测定六堡茶样品浸泡过滤，离心后取提取液，稀释过滤得待测定样品稀释液；

(4)取步(3)所得待测定样品稀释液使用液相质谱联用仪测定得待测定样品图谱，将待测定样品与对比质谱图数据库中数据匹配后得到测定结果。进一步的，所述的步骤(1)中，将儿茶素类物质和生物碱对照品经甲醇溶解稀释后制备得到10μg/mL的对照品稀释液。

进一步的，所述的步骤(2)和步骤(4)的测定包括液相色谱测定和质谱测定：

所述液相色谱测定条件为：

色谱柱：C₁₈色谱柱，3.0mm×15 0mm，2.7μm；进样量：3μL；柱温：30℃；流速：0.4mL/min；流动相：A:0.1％甲酸水溶液，B：乙腈；流动相梯度：0～1min：2％B；1～5min：2％B→10％B；5～15min：10％B→30％B；15～20min：30％B→40％B；20～23min：40％B→50％B；23～25min：50％B→60％B；25～27min：60％B→95％B；27～30min：95％B；30.01～35min：2％B；

所述质谱测定条件为：