[发明专利]联合检测人SMN1和SMN2基因的试剂盒及其应用

权利要求书

1.联合检测人SMN1和SMN2基因的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包括扩增17个基因座的特异性引物，其中基因座为同时检测 SMN1和SMN2基因同源的外显子1至外显子6的以下7个基因座：Exon1、Exon2a、Exon2b、Exon3、Exon4、Exon5、Exon6；和特异性检测SMN1基因外显子7和8的以下2个基因座：SMN1-Exon7、SMN1-Exon8；和特异性检测SMN2基因外显子7和8的以下2个基因座：SMN2-Exon7、SMN2-Exon8；和检测 “2+0型”携带者相关性SNP的以下5个基因座：g.11678 GT、g.22804 GA、g.26190 AG、g.27134 TG、g.27706-27707 del AT；以及检测内参基因ACTB；

所述扩增17个基因座的特异性引物的序列如下：Exon1、SEQ ID NO.1-2；Exon2a、SEQID NO.3-4；Exon2b、SEQ ID NO.5-6；Exon3、SEQ ID NO.7-8；Exon4、SEQ ID NO.9-10；Exon5、SEQ ID NO.11-12；Exon6、SEQ ID NO.13-14；SMN1-Exon7、SEQ ID NO.15-16；SMN2-Exon7、SEQ ID NO.17-18；SMN1-Exon8、SEQ ID NO.19-20；SMN2-Exon8、SEQ ID NO.21-22；ACTB、SEQ ID NO.23-24；g.11678 GT、SEQ ID NO.25-27；g.22804 GA、SEQ ID NO.28-30；g.26190 AG、SEQ ID NO.31-33；g.27134 TG、SEQ ID NO.34-37；g.27706-27707 delAT、SEQ ID NO.38-39；其中SMN1-Exon8、SMN2-Exon8及g.27706-27707 delAT共用下游引物，g.27134 T与SMN1-Exon7共用下游引物，g.27134 G与SMN2-Exon7共用下游引物；

所述试剂盒包括一套拷贝数校准质粒，每个外显子基因座及内参基因ACTB均有对应的拷贝数校准质粒。

2.根据权利要求1所述的联合检测人SMN1和SMN2基因的试剂盒，其特征在于，所述扩增17个基因座的特异性引物的浓度如下： SEQ ID NO.1-2、0.15μM；SEQ ID NO.3-4、0.18μM；SEQ ID NO.5-6、0.18μM；SEQ ID NO.7-8、0.25μM；SEQ ID NO.9-10、0.20μM；SEQ ID NO.11-12、0.35μM；SEQ ID NO.13-14、0.20μM；SEQ ID NO.15、0.30μM；SEQ ID NO.16、0.40μM；SEQID NO.17、0.25μM；SEQ ID NO.18、0.36μM；SEQ ID NO.19、0.18μM；SEQ ID NO.20、0.35μM；SEQ ID NO.21、0.18μM；SEQ ID NO.22、0.35μM；SEQ ID NO.23-24、0.15μM；SEQ ID NO.25-27、0.20μM；SEQ ID NO.28-30、0.20μM；SEQ ID NO.31-33、0.20μM；SEQ ID NO.34、0.20μM；SEQ ID NO.35、0.40μM；SEQ ID NO.36、0.20μM；SEQ ID NO.37、0.36μM；SEQ ID NO.38、0.10μM；SEQ ID NO.39、0.35μM。

3.根据权利要求1所述的联合检测人SMN1和SMN2基因的试剂盒，其特征在于，所述特异性引物的5’端采用以下荧光染料标记：FAM、HEX、TET、TAMRA、ROX、VIC、NED、ATTO系列或CY系列。