[发明专利]一种多胚柑橘品种快速脱除病毒病的方法

说明书

本申请公开了一种多胚柑橘品种快速脱除病毒病的方法，包括以下步骤：S1获取种子：通过人工异花授粉获得多胚柑橘品种的种子；S2叶片鉴定：取萌芽后的多胚柑橘的叶片鉴定有无病毒；S3移栽高接：取多胚柑橘无病毒幼苗的茎尖高接到基砧上；S4获取母本：多胚柑橘完全成熟、并鉴定珠心胚后代与母本株性状一致后，获得母本脱毒株。本发明的目的在于提供了一种多胚柑橘品种快速脱除病毒病的方法，运用一种新的思路解决多胚柑橘品种带毒种苗快速脱毒，其脱毒周期短，脱毒效果好，成活率高。

技术领域

本申请涉及果树种植技术领域，特别涉及一种多胚柑橘品种快速脱除病毒病的方法。

背景技术

柑橘是我国重要的经济作物之一，近年来我国柑橘产业一直保持着稳步发展的势头，种植面积与产量均稳步增长。但随着柑橘种植面积的不断扩大，病害问题也接踵而至。柑橘极易感染一种或多种病毒类病害，导致植株生长发育受阻、产量降低、果品品质变劣，严重者甚至导致植株死亡。柑橘病毒类病害主要由病毒和类似病毒引起，即由病毒、类病毒、螺旋体和植原体等病原引起的。目前，世界上已报道的柑橘病毒和类似病毒病约有80余种，多具有易传播、危害性大、多种病原复合侵染率高、感染后树体终身带毒和难以防治等特点。我国较常见且对柑橘生产危害较大的病毒类病害主要有柑橘黄龙病、裂皮病、衰退病和碎叶病等。这些病害均可通过苗木转运和芽条嫁接引种进行远距离传播，同时还能在田间通过农事操作和昆虫等进行近距离扩散。目前，针对柑橘病毒类病害尚无有效的防治措施，只能通过严格检疫、对本地良种进行脱毒处理、建立无病毒苗木繁育和推广体系、对已有疑似感染果树进行检测，并对病株进行铲除等手段进行防控。

热处理脱毒法是国际上最早和最普遍的果树脱毒处理方法，其利用病毒不耐高温的特点，通过加热使植株中的病毒钝化失活，从而起到脱除病毒的作用。但是由于不同种类病毒的热抗性不同，通常使用35～40℃的热处理对线状病毒、类细菌、类菌质体等引起的病害脱除有效，对于耐热性高的类病毒如裂皮病病毒等则没有效果。

茎尖组织培养脱毒是科研单位最常用和最主流的果树脱毒处理方法，其利用病毒通过植物维管束和胞间连丝进行传播，而植物分生区尤其是茎尖生长点(约0.1～0.5mm区域)无维管束，且细胞分裂增殖速度较病毒扩散速度快，因此茎尖生长点含毒量极低，切取这类微小的无病毒组织进行培养即可获得无病毒植株。由于茎尖生长点范围极小，切取的茎尖越小，脱毒效果越好，但是切取茎尖越小，愈伤组织形成越难，脱毒周期越长。

发明内容

为了克服现有技术的不足，本发明的目的在于提供了一种多胚柑橘品种快速脱除病毒病的方法，运用一种新的思路解决多胚柑橘品种带毒种苗快速脱毒，其脱毒周期短，脱毒效果好，成活率高。

为达到以上目的，本申请提供了一种多胚柑橘品种快速脱除病毒病的方法，包括以下步骤：S1获取种子：通过人工异花授粉获得多胚柑橘品种的种子；S2叶片鉴定：取萌芽后的多胚柑橘的叶片鉴定有无病毒；S3移栽高接：取多胚柑橘无病毒幼苗的茎尖高接到基砧上；S4获取母本：多胚柑橘完全成熟、并鉴定珠心胚后代与母本株性状一致后，获得母本脱毒株。

与现有技术相比，本申请的有益效果在于：病毒通过植物维管束和胞间连丝进行传播，而植物分生区尤其是茎尖生长点无维管束，且细胞分裂增殖速度较病毒扩散速度快，因此茎尖生长点含毒量极低，切取这类微小的无病毒组织进行培养即可获得无病毒植株，现有技术通过切取茎尖并进行茎尖微芽嫁接，但茎尖较小而导致成活率较低，以及对部分病毒如碎叶病等的脱除无效等诸多问题；本申请通过对萌芽后的多胚柑橘的叶片鉴定病毒，通过叶片鉴定可基本排除有病毒的个体，并将无病毒幼苗的茎尖高接到基砧上，使得高接的茎尖较大，从而提升成活率，高接到基砧上则可快速的实现幼苗的提早挂果，缩短生长周期，提升经济效益，最后通过鉴定珠心胚后代与母本株性状一致，可排除脱毒不干净以及珠心胚变异等问题，并通过幼苗期病毒检测对照能理论上保障脱毒效果。