[发明专利]一种二氧化碳抑制腐败希瓦氏菌致腐性能的测试方法

权利要求书

1.一种二氧化碳抑制腐败希瓦氏菌致腐性能的测试方法，其特征在于按以下步骤进行：

（1）活化菌液：将冷冻保存的腐败希瓦氏菌种取出解冻，然后加入到胰蛋白胨大豆肉汤（trypticase soy broth，TSB）培养基中，摇床震荡培养10~14 h，获得一次培养液；

（2）制备菌悬液：将一次培养液接种到液体培养基中，再次摇床震荡培养4~8 h，制成细菌浓度为10⁶~10⁸ CFU/mL的菌悬液；

（3）准备并处理试样：准备水产品食材进行处理后，切成若干个质量为80~120 g的片状食材，然后用0~4℃的水洗净并沥干，制成试样；

（4）接菌处理：将若干个试样浸入乙醇溶液中20~40s，然后取出，用无菌蒸馏水洗涤2~4次，再用紫外线杀菌15~25 min，获得若干个杀菌试样；稀释菌悬液至细菌浓度为10³~10⁵CFU/mL，然后用稀释后的菌悬液对杀菌试样进行接菌处理，获得若干个接菌处理试样；

（5）包装入袋：将若干个接菌处理试样分别装入气调包装袋中；

（6）气调包装：启动袋式气调包装机并启动真空泵，采用气调包装模式进行包装；包装时的保鲜气体中CO₂的体积百分比为0~100%，其余为N₂；

（7）冰箱冷藏：完成包装的接菌处理试样置于冰箱中，在4.0± 0.5℃条件下贮藏；

（8）性能测试：分别在贮藏0~18天后随机取三份样品作为平行组，对平行组进行检测，测试不同CO₂浓度的保鲜气体条件下对腐败希瓦氏菌致腐性能的抑制效果。

2.根据权利要求1所述的二氧化碳抑制腐败希瓦氏菌致腐性能的测试方法，其特征在于步骤（1）中，胰蛋白胨大豆肉汤培养基的用量为5~10 mL。

3.根据权利要求1所述的二氧化碳抑制腐败希瓦氏菌致腐性能的测试方法，其特征在于步骤（2）中，接种的接种量按质量百分比为0.5~1.5%。

4.根据权利要求1所述的二氧化碳抑制腐败希瓦氏菌致腐性能的测试方法，其特征在于步骤（4）中，乙醇溶液的质量浓度为70~80%，乙醇溶液的用量按质量比为乙醇溶液﹕试样=（2～4）﹕1。

5.根据权利要求1所述的二氧化碳抑制腐败希瓦氏菌致腐性能的测试方法，其特征在于步骤（4）中，将样品按照稀释后的菌悬液为杀菌试样质量的5~15%，使杀菌试样的细菌含量≤10⁵ CFU/ mL。

6.根据权利要求1所述的二氧化碳抑制腐败希瓦氏菌致腐性能的测试方法，其特征在于步骤（6）中，进行包装时，设置每个气调包装袋内保鲜气体体积与接菌处理试样的质量比为2~4 mL/g；设置抽真空时间为5~15s，充气时间为3~5s，热封口温度为125~150℃；设置保鲜气体源压力为4~6 kg/cm²，动力气体源压力为7~8 kg/cm²；当袋式气调包装机运行稳定后，将装有接菌处理试样的气调包装袋袋口置于气体置换及热封口处，进行气调包装。

7.根据权利要求1所述的二氧化碳抑制腐败希瓦氏菌致腐性能的测试方法，其特征在于步骤（8）中，检测内容为菌落总数、生物被膜、三磷酸腺苷含量、巯基含量、肌原纤维蛋白三级结构、肌原纤维蛋白超微结构和硬度值。