[发明专利]一种一测多评测定川芎中有效成分的方法

权利要求书

1.一种测定川芎中有效成分的方法，其特征在于，所述有效成分为：洋川芎内酯I、洋川芎内酯H、洋川芎内酯A、阿魏酸松柏酯和藁本内酯；

以洋川芎内酯I为内参，分别计算各有效成分的相对校正因子，采用液相色谱进行测定，根据液相色谱测试结果和相对校正因子计算各有效成分含量；具体步骤如下：

(1)色谱条件与系统适应性试验：

色谱柱：C18色谱柱；

流动相A：水；流动相B：甲醇；

洗脱梯度如下：

0～10min：42～55％流动相B；

10～30min：55～70％流动相B；

30～40min：70～80％流动相B；

40～45min：80％流动相B；

(2)对照品溶液的制备：

分别精密称定各有效成分的对照品，加甲醇制成对照品溶液；

(3)供试品溶液的制备：

精密称取川芎样品粉末，加甲醇溶解制得供试品溶液；

(4)相对校正因子的确定：

将步骤(2)制备的对照品溶液注入高相液相色谱仪，记录得到的各有效成分色谱峰面积，按照如下公式计算相对校正因子f_s/i：

f_s/i＝(A_s/C_s)/(A_i/C_i)

其中，A_i为非内参有效成分的峰面积，C_i为对照品溶液中非内参有效成分的浓度或重量；A_s为内参的峰面积，C_s为对照品溶液中内参的浓度或重量；

(5)供试品中成分的测定：

将步骤(3)制备的供试品溶液注入高相液相色谱仪，记录得到的各有效成分色谱峰面积，按照如下公式计算供试品溶液中各有效成分的浓度：

C_内参＝A_内参C_s/A_s；

C＝f_s/i·A·C_内参/A_内参；

其中，A_内参是供试品溶液测得的内参的峰面积，C_内参是供试品溶液中内参的浓度或重量，A_i为步骤(4)对照品溶液测得的内参的峰面积，C_i为步骤(4)对照品溶液中内参的浓度或重量；A为供试品溶液测得的非内参有效成分的峰面积，C为供试品溶液中非内参有效成分的浓度或重量。

2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(1)所述色谱柱为C18色谱柱，柱温25～35℃，检测波长为270～290nm，流速为0.8～1.2mL/min。

3.如权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(2)所述对照品溶液中，每毫升对照品溶液含洋川芎内酯I 0.0200～0.0300mg、洋川芎内酯H 0.0600～0.0700mg、洋川芎内酯A0.3000～0.4000mg、阿魏酸松柏酯0.0500～0.1500mg、藁本内酯0.5000～0.6000mg。

4.如权利要求3所述的方法，其特征在于，步骤(2)所述对照品溶液中，每毫升对照品溶液含洋川芎内酯I 0.0270mg、洋川芎内酯H 0.0670mg、洋川芎内酯A 0.3930mg、阿魏酸松柏酯0.1000mg、藁本内酯0.5140mg。

5.如权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(3)所述加甲醇溶解的方法为：川芎样品粉末加甲醇，超声处理20～40min后，再加甲醇补足超声处理过程中损失的重量，过滤。

6.如权利要求5所述的方法，其特征在于，所述过滤为先用滤纸过滤，滤液经0.22μm微孔滤膜过滤。

7.如权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(4)所述对照品溶液注入高效液相色谱仪的进样量为5～20μL。