[发明专利]一种采用微生物发酵法制备鲑鱼皮胶原蛋白的方法

说明书

本发明属于胶原蛋白制备技术领域，公开了一种采用微生物发酵法制备鲑鱼皮胶原蛋白的方法。包括鲑鱼皮成粉、制备发酵所用菌培养基、制备半固体发酵培养基、发酵培养。采用微生物发酵法制备胶原蛋白，相比于生物酶法可产生具有活性的酶，并且操作简单，条件温和，成本低廉，得到的蛋白多肽具有良好的功能性，在一定程度上还能达到除腥、除臭的效果，使最终发酵产品更具营养价值。

技术领域

本发明属于胶原蛋白制备技术领域，具体涉及一种采用微生物发酵法制备鲑鱼皮胶原蛋白的方法。

背景技术

鲑鱼具有很高营养价值且口感好，最受欢迎的食用鱼品种之一。全球每年鲑鱼产量达到260多万t，但鲑鱼加工过程中产生的大量鱼皮、鱼骨、鱼头等副产物被作为制作鱼粉和饲料的原料进行回收或被丢弃造成环境污染，对其中的有价值成分尚需进一步开发利用。鲑鱼鱼皮是丰富的海洋蛋白资源，含有丰富的胶原蛋白。由于氨基酸组成和交联度等方面的差异，使得水产动物的胶原蛋白具有很多陆地畜类胶原蛋白所没有的优点，且水产动物的胶原蛋白具有更高的生物活性及生物相容性，广泛应用于食品、化妆品和医药用品领域。因此，对于水产胶原蛋白的研究日益广泛。

目前有研究使用物理、化学或生物酶法提取鱼皮中的胶原蛋白，其中物理和化学法提取效果不佳，且加工过程及化学试剂对胶原蛋白的活性影响较大。生物酶法提取鱼皮胶原蛋白的得率较高，且具有提高蛋白活性的作用。但生物酶法的提取成本相对较高。

发明内容

为了克服现有技术的不足，本发明提供一种采用微生物发酵法制备鲑鱼皮胶原蛋白的方法，以鲑鱼皮为原料，采用微生物发酵法制备鲑鱼皮胶原蛋白，通过筛选发酵菌株，采用单因素和响应面法优化微生物发酵条件，评价发酵后鲑鱼皮蛋白抗氧化活性，分析氨基酸组成含量及发酵对挥发性物质和风味物质的影响，为后续发酵鱼皮蛋白在食品、保健品领域应用研究提供实验数据基础。

本发明的上述目的是通过以下技术方案实现的：一种采用微生物发酵法制备鲑鱼皮胶原蛋白的方法，步骤如下：

1.将新鲜鲑鱼鱼皮于65℃烘干5d，然后使用粉碎机打成粉状，过筛后于干燥器保藏备用；

2.根据发酵所用菌制作相应培养基，将发酵所用菌接种于相应培养基中，在温度30℃、转速30r/min的条件下培养48h而后放入恒温箱培养72h备用；

3.制备半固体发酵培养基：步骤1制得的干鱼皮粉与蒸馏水混合，高压灭菌后备用；

4.将发酵所用菌接入步骤3所述的半固体发酵培养基中进行发酵培养，培养处理后的发酵液经温度为4℃、转速为8000r/min的条件下离心20min后取其上清液。

进一步的，所述步骤1中筛目数为60目。

进一步的，所述步骤2中发酵所用菌为细菌、酵母菌、霉菌中的一种。

进一步的，所述步骤2中发酵所用菌接种于相应培养基的接种量为相应培养基体积分数的4％、6％、8％、10％、12％中任一种。

进一步的，所述步骤3中干鱼皮粉与蒸馏水质量比为1：1.5、1：2、1：3、1：4中任一种。

进一步的，所述步骤2中发酵所用菌细菌具体为凝结芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、保加利亚乳杆菌、嗜酸乳杆菌中的一种。

进一步的，所述步骤2中发酵所用菌为细菌时，相应培养基为LB液体培养基，LB液体培养基成分具体为胰蛋白胨10g/L，酵母膏5g/L，NaCl 5g/L，LB液体培养基中细菌浓度为10⁸cfu/mL，步骤2中恒温箱温度为37℃。

进一步的，所述步骤2中发酵所用菌酵母菌具体为酿酒酵母、面包酵母中的一种。