[发明专利]一株杂色曲霉ZLH-1、蛋白酶及其制备方法和应用

权利要求书

1.一株杂色曲霉ZLH-1，其特征在于，所述杂色曲霉分类命名为杂色曲霉Aspergillus versicolor，于2021年9月13日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，菌种保藏号为CGMCC NO.23230。

2.根据权利要求1所述的杂色曲霉ZLH-1，其特征在于，所述杂色曲霉ZLH-1在PDA培养基上正面菌体呈絮状，菌落不平，中央部分隆起；菌体颜色随生长时间变化，初为白色，后呈不同程度的黄绿色，边缘始终为白色，所述杂色曲霉ZLH-1产生可溶性色素，扩散于基质中，初始为黄色，随着时间的增长，转变为红色。

3.一种如SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列的蛋白酶。

4.根据权利要求3所述的蛋白酶，其特征在于，所述蛋白酶为M35家族的氘解素金属蛋白酶。

5.根据权利要求4所述的蛋白酶，其特征在于，所述M35家族的氘解素金属蛋白酶为纤溶酶。

6.根据权利要求5所述的蛋白酶，其特征在于，所述纤溶酶的分子量为37.28kDa。

7.根据权利要求6所述的蛋白酶，其特征在于，所述纤溶酶是由权利要求1所述的杂色曲霉ZLH-1通过发酵而产生的，所述杂色曲霉ZLH-1产酶步骤如下：

（1）利用PDA固体培养基在28-32℃下活化杂色曲霉ZLH-1，后将其接种至种子培养基中，发酵条件为28-32℃、160-200 rpm培养20-26 h，即获得种子液；

（2）将上述种子液按2-5%的体积比接种至麦芽汁液体培养基中发酵，发酵条件为28-32℃、160-200rpm培养5-7 d获得发酵液，发酵上清液加入固体硫酸铵至饱和度90%，分离沉淀，获得粗酶；

（3）将上述粗酶溶解、除盐和阴离子交换柱分离后获得纤溶酶。

8. 权利要求7所述的蛋白酶，其特征在于，所述种子培养基的配方为新鲜马铃薯200.0 g，葡萄糖20.0 g，麸皮5g，定容至1L。

9.权利要求3~8所述的蛋白酶在降解蛋白中的用途，其特征在于，所述蛋白酶能降解酪蛋白和/或纤维蛋白。

10.根据权利要求9所述的用途，其特征在于，所述蛋白酶优先降解纤维蛋白的γ链，后降解α，β链。

11.根据权利要求9所述的用途，其特征在于，所述蛋白酶能够溶解血栓。