[发明专利]基于亚铁离子-过氧化氢-罗丹明体系荧光猝灭法测定CAT活度的方法

权利要求书

1. 基于亚铁离子-过氧化氢-罗丹明体系荧光猝灭法测定CAT活度的方法，其特征在于：该方法基于H₂O₂-RhB-Fe²⁺荧光猝灭体系实现过氧化氢酶(CAT)活度的测定，荧光物质罗丹明B于585 nm处有特征荧光峰，Fenton试剂作用致其荧光猝灭，CAT实现H₂O₂的分解，基于CAT加入前后荧光变化△F确定CAT活度。

2.如权利要求1所述的基于亚铁离子-过氧化氢-罗丹明体系荧光猝灭法测定CAT活度的方法，其特征在于：该方法包括如下步骤：

在50mL的容量瓶中加入25~100 μL血清和2.80mL H₂O₂，30 ^oC水浴反应20 min，然后依次加入罗丹明B 4.00 mL 、缓冲溶液 2.50 mL 和Fe²⁺ 0.40 mL ，室温反应15 min后定容，蒸馏水作参比，在585 nm发射波长处测荧光强度F；

同步测定酶空白体系F₀，测定时，在50mL的容量瓶中加入25~100 μL血清，依次加入罗丹明B 4.00 mL 、缓冲溶液 2.50 mL 和Fe²⁺ 0.40 mL，振荡0.5min使酶失活后，加入2.80mLH₂O₂，室温反应15min后定容，蒸馏水作参比，在585 nm发射波长处测荧光强度F₀；

由△F确定CAT活度E，其中，△F = F -F₀)，△F =-3.466+1472E(U/mL)，r=0.9954。