[发明专利]一种淡水鱼中土腥味物质的测定方法

权利要求书

1.一种淡水鱼中土腥味物质的测定方法，其特征在于，包括以下步骤：

第一步，采用10-50mL正己烷分两次提取2-10g淡水鱼肉糜中的土腥味物质获得提取液；

第二步，在第一步获得的提取液中加入C18粉、石墨化炭黑、无水硫酸镁，C18粉、石墨化炭黑、无水硫酸镁的质量比是1:1:(3～5)，充分振荡后离心以达到净化效果；

第三步，采用硅胶固相萃取柱进行样品提取液的净化和浓缩获得洗脱液；

第四步，用气相色谱-质谱法测定第三步获得的洗脱液中土腥味物质的含量。

2.根据权利要求1所述的淡水鱼中土腥味物质的测定方法，其特征在于，所述淡水鱼选自鲫鱼、草鱼。

3.根据权利要求1所述的淡水鱼中土腥味物质的测定方法，其特征在于，所述第一步包括以下步骤：将淡水鱼肉糜中加入正己烷充分震荡，第一次超声、第一次离心，取上清至离心管中；再在鱼肉中加入正己烷充分震荡，第二次超声、第二次离心，取上清合并加入离心管中。

4.根据权利要求3所述的淡水鱼中土腥味物质的测定方法，其特征在于，所述第一步中第一次超声的时间为5min-30min；

所述第一步中第二次超声的时间为5min-30min。

5.根据权利要求3所述的淡水鱼中土腥味物质的测定方法，其特征在于，所述第一步中第一次离心的转速为4000r/min-10000r/min，时间为5min-30min；

所述第一步中第二次离心的转速为4000r/min-10000r/min，时间为5min-30min。

6.根据权利要求1所述的淡水鱼中土腥味物质的测定方法，其特征在于，所述第二步中离心的转速为2000r/min-10000r/min，时间为3min-10min。

7.根据权利要求1所述的淡水鱼中土腥味物质的测定方法，其特征在于，所述第三步包括以下步骤：硅胶柱用3～10mL正己烷活化，第二步离心后的上清液过柱，用正己烷1～10mL淋洗，吹干固相萃取柱，用体积比为(1～3):1的正己烷/乙酸乙酯1～5mL洗脱，吹干固相萃取柱，接收洗脱液，漩涡混合后放入进样小瓶。

8.根据权利要求1所述的淡水鱼中土腥味物质的测定方法，其特征在于，所述第四步中气相色谱条件：HP-5MS毛细管柱：30m×0.25mm×0.5μm；高纯氦气99.999％，采用恒流模式，载气流速1.0mL/min；程序升温控制，初始温度60℃，保持1min，以5℃/min升至120℃，保持3min，再以10℃/min升至170℃，保持1min，再以20℃/min升至280℃，保持5min；进样口温度250℃，不分流进样。

9.根据权利要求1所述的淡水鱼中土腥味物质的测定方法，其特征在于，所述第四步中质谱条件：电子轰击离子源EI，离子源温度250℃，传输线温度280℃，电子能量70eV，选择离子扫描SIM模式采集数据。

10.根据权利要求1所述的淡水鱼中土腥味物质的测定方法，其特征在于，所述土腥味物质为土臭素、2-甲基异冰片；

所述土臭素的含量为0.4-100μg/kg；

所述2-甲基异冰片的含量为0.4-100μg/kg。