[发明专利]多种呼吸道病毒核酸质谱检测的引物组合、试剂盒及检测方法在审
| 申请号： | 202210074260.8 | 申请日： | 2022-01-21 |
| 公开（公告）号： | CN114350857A | 公开（公告）日： | 2022-04-15 |
| 发明（设计）人： | 翟志向;周晓光;宋合兴;李运涛 | 申请（专利权）人： | 生物岛实验室;广东默迪优谱生物科技有限公司 |
| 主分类号： | C12Q1/70 | 分类号： | C12Q1/70;C12Q1/686;C12N15/11 |
| 代理公司： | 北京智信四方知识产权代理有限公司 11519 | 代理人： | 葛啟宏 |
| 地址： | 510320 广东省广*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 多种 呼吸道 病毒 核酸 检测 引物 组合 试剂盒 方法 | ||
1.一种用于多种呼吸道病毒核酸质谱检测的引物组合，其特征在于，包括48条扩增引物和24条质量探针延伸引物，其中，扩增引物的核苷酸序列如SEQ ID No.1-48所示；质量探针延伸引物的核苷酸序列如SEQ ID No.49-72所示。
2.权利要求1所述的引物组合在制备多种呼吸道病毒核酸质谱检测产品中的应用。
3.一种用于多种呼吸道病毒核酸质谱检测的试剂盒，其特征在于，包括权利要求1所述的引物组合。
4.根据权利要求3所述的试剂盒，其特征在于，还包括RT-PCR反应试剂、去磷酸化反应试剂及质量探针延伸反应试剂。
5.一种检测多种呼吸道病毒的方法，其特征在于，所述方法使用如权利要求3或4所述的试剂盒，包括：
(1)利用48条扩增引物对待测样本进行RT-PCR扩增反应；
(2)对步骤(1)得到的扩增产物利用碱性磷酸酶进行去磷酸化处理；
(3)利用24条质量探针延伸引物对步骤(2)得到去磷酸化产物进行单碱基延伸；
(4)对步骤(3)得到的延伸产物进行树脂脱盐纯化；
(5)质谱检测，确定病原体种类。
6.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，所述多种呼吸道病毒为呼吸道合胞病毒A和B、副流感病毒1型至4型、人偏肺病毒A和B、人博卡病毒1型和2型、鼻病毒、甲流病毒通用型、甲流病毒H1N1、甲流病毒H3N2、甲流病毒H1N12009、乙流病毒、冠状病毒-SARS、冠状病毒-MERS、新型冠状病毒SARS-CoV-2和腺病毒。
7.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，所述质谱检测采用的是基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱MALDI-TOF MS。
8.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，所述碱性磷酸酶为虾碱性磷酸酶。
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