[发明专利]恒温条件检测结核分枝杆菌异烟肼耐药性的方法与试剂盒

权利要求书

1.一种用于检测结核分枝杆菌异烟肼耐药性的引物组合，其特征在于，所述引物组合包括引物组I和引物组II；

所述引物组I包括外引物KatG-F3、外引物KatG-B3、内引物KatG-FIP、内引物KatG-BIP、环引物KatG-LB；

所述外引物KatG-F3的核苷酸序列为ACGACGTCGAAACAGCGG(SEQ ID NO：1)，

所述外引物KatG-B3的核苷酸序列为CCCACTCGTAGCCGTACAGG(SEQ ID NO：2)，

所述内引物KatG-FIP的核苷酸序列为AGCGGAGCAGCCTCGGGTTCGCACACTTTCGGTAAGACCCA(SEQ ID NO：3)，

所述内引物KatG-BIP的核苷酸序列为GCTGGAAGAGCTCGTATGGCACCGCTGTTGTCCCATTTCGTCG(SEQ ID NO：4)，

所述环引物KatG-LB的核苷酸序列为ATCACCAGCGGCATCGAGGTCG(SEQ ID NO：5)；

所述引物组II包括外引物InhA-F3、外引物InhA-B3、内引物InhA-FIP、内引物InhA-BIP、环引物InhA-LB；

所述外引物InhA-F3的核苷酸序列为TCGTAGGGCGTCAATACACC(SEQ ID NO：6)，

所述外引物InhA-B3的核苷酸序列为CTCCGGTAACCAGGACTGAA(SEQ ID NO：7)，

所述内引物InhA-FIP的核苷酸序列为CTGGGGTTACGCTCGTGACGCCAGAAAGGGATCCGTCA(SEQ ID NO：8)，

所述内引物InhA-BIP的核苷酸序列为ACTGAAGGGGCCAAACCCGGGTTTGGCCCCTTCAGT(SEQID NO：9)，

所述环引物InhA-LB的核苷酸序列为GAGACGATAGGTTGTCGGGGTGACT(SEQ ID NO：10)。

2.如权利要求1所述的引物组合，其特征在于，还包括分子信标探针katG-M和分子信标探针inhA-M；

所述分子信标探针katG-M的核苷酸序列为CGAGCCGACCTGGATGCCGCTGATGGCTCG(SEQ IDNO：11)，

所述分子信标探针inhA-M的核苷酸序列为CAGCCAGTCACCGCCACAACCTATCGTCTCGCCGGCTG(SEQ ID NO：12)。

3.如权利要求2所述的引物组合，其特征在于，所述分子信标探针katG-M和所述分子信标探针inhA-M各自独立地含有选自下组的修饰：

所述分子信标探针的5’端修饰有荧光基团，选自FAM、HEX、ROX、TAMRA、Texas RED、CY5、Cy3、TET、JOE、VIC中的一种或多种；所述分子信标探针的3’端修饰有淬灭基团，选自BHQ1、BHQ2、Dabcy1、TAMRA、MGB、ECLIPSE中的一种或多种。

4.权利要求1-3任一项所述引物组合在检测结核分枝杆菌异烟肼耐药性中的应用，其特征在于，包括以待测样本的DNA为模板，利用所述引物组合进行等温扩增和熔解曲线检测。

5.权利要求1-3任一项所述引物组合在制备检测结核分枝杆菌异烟肼耐药性的试剂中的应用。

6.一种检测结核分枝杆菌异烟肼耐药性的试剂盒，其特征在于，包括权利要求1-3任一项所述的引物组合、Bst DNA聚合酶和含dNTPs的反应液。