[发明专利]抗真菌脂肽及链霉菌在抗真菌脂肽制备中的应用

权利要求书

1.一种抗真菌脂肽，其特征在于：其化学式为C₅₃H₈₂N₁₀O₁₉，其结构式如下：

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2.链霉菌在抗真菌脂肽制备中的应用，其特征在于，其包括将链霉菌及其培养基进行冷冻处理后，再对其进行解冻和加压过滤处理以获得菌液，所得菌液经浓缩和醇提取后，获得粗提物，该粗提物经复溶、正丁醇等体积萃取多次后，收集有机相进行浓缩，再将浓缩物调整至预设浓度后，通过固相萃取柱，然后经多级梯度洗脱处理，再收集洗脱物，对其进行分离纯化后，制得抗真菌脂肽，所述抗真菌脂肽包括脂肽A和脂肽B，其中，所述脂肽A的化学式为C₅₄H₈₄N₁₀O₁₉，其结构式为：

所述脂肽B的化学式为C₅₃H₈₂N₁₀O₁₉，其结构式为：

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3.如权利要求2所述的链霉菌在抗真菌脂肽制备中的应用，其特征在于，所述链霉菌为链霉菌XY006，其被命名为链霉菌Streptomyces sp.，已于2021年12月13日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号，保藏编号为CGMCC No.24090。

4.如权利要求3所述的链霉菌在抗真菌脂肽制备中的应用，其特征在于，其具体包括如下步骤：

(1)将链霉菌XY006在MS培养基上划板活化后，于30℃环境下培养3天；然后挑取单菌落于MYG培养基，并在28℃和200rpm的条件下培养2天，然后按1.0％量转接到MYG培养基进行培养，使其在28℃、200rpm条件下摇床培养6天，然后6000g离心处理，舍弃部分上清液后，将菌液用于MS固体培养基涂板；每皿100μL，涂布均匀，于30℃培养七天；

(2)将培养好的链霉菌XY006转入-80℃低温冷冻24h，然后室温完全解冻，通过多层纱布包裹再施压挤出菌液，余下培养基残渣于甲醇中浸泡4h，再经多层纱布包裹施压过滤，最后合并两次的滤出液，将其置于旋转蒸发仪浓缩到预设体积；继而12000g离心10min，取上清，加入终浓度为70％的甲醇于4℃静置提取，再12000g离心10min保留上清，继而通过旋转蒸发仪浓缩到预设体积，再置于冷冻干燥仪中冷冻干燥，制得粗提物，将其保存于-20℃环境下；

(3)将粗提物用纯水完全复溶后，用正丁醇进行等体积液液萃取，萃取三次，合并三次的有机相，静置过夜，再收集有机相，对其进行浓缩处理至干，再用纯水复溶后，对其进行冷冻干燥，制得产物A，且将其保存于-20℃；

(4)将产物A调整至上样浓度为500mg/mL，以3～5mL的上样体积将其通过固相萃取柱进行萃取处理，再经多级梯度洗脱处理，再收集洗脱物；

(5)对洗脱物进行复溶，然后离心去除沉淀后，进行液相色谱分离纯化处理，制得抗真菌脂肽。

5.如权利要求4所述的链霉菌在抗真菌脂肽制备中的应用，其特征在于，步骤(4)中，多级梯度洗脱处理的洗脱液依序为100％H₂O、20％MeOH、40％MeOH、60％MeOH、80％MeOH、100％MeOH，其中，MeOH质量浓度为非100％的溶液中，其余部分为水。

6.如权利要求4所述的链霉菌在抗真菌脂肽制备中的应用，其特征在于，步骤(5)中，对洗脱物进行复溶，然后离心去除沉淀后，将溶液依序通过甲醇和水为流动相、乙腈和水为流动相的液相色谱进行分离纯化处理，制得抗真菌脂肽。