[发明专利]一种水产养殖用复合微生物制剂的制备方法

权利要求书

1.一种水产养殖用复合微生物制剂的制备方法，其特征在于：制备所述复合微生物制剂原料包括紫色非硫光合细菌20-30份、酿酒酵母菌5-10份、枯草芽孢杆菌1-5份、蛭弧菌1-5份、复合EM菌5-10份和碳源；其中所述碳源为农作物植物纤维，选自芦苇纤维、秸秆纤维和玉米芯纤维中的一种或多种；所述制备方法包含如下步骤：

步骤一、制作碳源培养基：向农作物植物纤维中添加碱溶液进行浸泡预处理，向预处理之后的纤维素中添加纤维素分解菌，得到碳源混合液，并制成培养基；

步骤二、筛选纯化紫色非硫光合细菌：采用物理除氧厌氧培养法获得紫色非硫光合细菌富集培养液后，再对紫色非硫光合细菌进行分离纯化；

步骤三、菌种的液体发酵：将各菌种在其适宜的培养条件下活化培养，再分别将其接种到步骤一制成的培养基中扩大培养至对数生长期；

步骤四、菌株液混合：调节OD₆₀₀=1.5，然后将各菌株培养液混合，备用；

步骤五、菌种的真空冷冻干燥：将步骤四的混合菌液进行离心处理，移去上清液后再加入冻干保护剂，之后在-76℃的环境下预冻1-5h，再将冻结样品移入真空冷冻干燥机中冷冻干燥，制成菌粉；

步骤六、菌粉包装：采用水溶性材料将菌粉进行包裹，并在包装后贮存在阴凉、干燥、通风、清洁的仓库中，即可。

2.根据权利要求1所述的一种水产养殖用复合微生物制剂的制备方法，其特征在于：所述碱溶液为质量分数1-5%的NaOH溶液。

3.根据权利要求1所述的一种水产养殖用复合微生物制剂的制备方法，其特征在于：步骤二中，试管中的单菌落采用双层平板法进行纯化，且保存已经纯化的菌株。

4.根据权利要求1所述的一种水产养殖用复合微生物制剂的制备方法，其特征在于：步骤四中，若OD₆₀₀1.5，用培养液稀释至0D₆₀₀=1.5；若OD₆₀₀1.5，离心后移去部分上清液，再调整至0D₆₀₀=1.5。

5.根据权利要求1所述的一种水产养殖用复合微生物制剂的制备方法，其特征在于：步骤五中，离心设备温度调节在1-5℃，且转速为3000-6000r/min，离心时间为10min。

6.根据权利要求1所述的一种水产养殖用复合微生物制剂的制备方法，其特征在于：步骤六中，菌粉贮存环境的温度在35℃以上，所述菌粉采用真空包装或者充氮气包装。