[发明专利]一种基因重组串联表达利那洛肽的工程菌在审
| 申请号： | 202210082694.2 | 申请日： | 2022-01-24 |
| 公开（公告）号： | CN114350587A | 公开（公告）日： | 2022-04-15 |
| 发明（设计）人： | 吴寅嵩;谭莹莹;万民熙;金锋;杨晓爽 | 申请（专利权）人： | 修实生物医药（南通）有限公司 |
| 主分类号： | C12N1/21 | 分类号： | C12N1/21;C12N15/70;C07K19/00;C12N15/62;C07K7/08;C12R1/19 |
| 代理公司： | 济南市易拓知识产权代理事务所(普通合伙) 37325 | 代理人： | 江莉莉 |
| 地址： | 226006 江苏省*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 基因 重组 串联 表达 工程 | ||
【权利要求书】：
1.一种基因重组串联表达利那洛肽的工程菌，其特征在于，保藏编号为CGMCC No.23800，分类命名为大肠埃希氏菌Escherichia coli，保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心。
2.如权利要求1所述工程菌在合成利那洛肽中应用。
3.如权利要求2所述工程菌在合成利那洛肽中应用，其特征在于，所述利那洛肽表达步骤包括：
（1）工程菌构建；
（2）摇瓶培养及发酵罐放大；
（3）融合蛋白提取；
（4）酶切及环化；
（5）纯化及检测。
4.如权利要求3所述工程菌在合成利那洛肽中应用，其特征在于，所述发酵参数为：溶氧30%-40%，pH=7.0，补料为70%葡萄糖。
5.如权利要求3所述工程菌在合成利那洛肽中应用，其特征在于，所述摇瓶培养的培养基为LB培养基，且含卡那霉素。
6.如权利要求3所述工程菌在合成利那洛肽中应用，其特征在于，所述摇瓶培养的接种量为1%。
7.如权利要求3所述工程菌在合成利那洛肽中应用，其特征在于，所述发酵过程添加IPTG。
8.如权利要求7所述工程菌在合成利那洛肽中应用，其特征在于，加入IPTG后进一步诱导并收集，优选地，诱导温度为25-37℃，诱导时间为4-12h，最优的，诱导温度为30℃，诱导时间为8h。
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