[发明专利]一种斑石鲷RhoGEF10重组基因及性别鉴定方法和试剂盒有效
| 申请号： | 202210083551.3 | 申请日： | 2022-01-25 |
| 公开（公告）号： | CN114107314B | 公开（公告）日： | 2022-05-06 |
| 发明（设计）人： | 肖永双;吴燕铎;李军;肖志忠;马玉婷;赵海霞;马道远;刘静 | 申请（专利权）人： | 中国科学院海洋研究所 |
| 主分类号： | C12N15/12 | 分类号： | C12N15/12;C12Q1/6888;C12Q1/6879 |
| 代理公司： | 沈阳科苑专利商标代理有限公司 21002 | 代理人： | 李颖 |
| 地址： | 266071 *** | 国省代码： | 山东;37 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 斑石鲷 rhogef10 重组 基因 性别 鉴定 方法 试剂盒 | ||
1.一种斑石鲷RhoGEF10重组基因，其特征在于，斑石鲷RhoGEF10重组基因为SEQ IDNO:1所示碱基序列第55位点和56位点之间插入DNA序列片段。
2.按权利要求1所述的斑石鲷RhoGEF10重组基因，其特征在于，所述斑石鲷RhoGEF10重组基因为所述SEQ ID NO:1所示碱基序列第55位点和56位点之间插入DNA序列片段，即得SEQ ID NO:2所示碱基序列。
3.一种权利要求1所述的斑石鲷RhoGEF10重组基因的应用，其特征在于，所述斑石鲷RhoGEF10重组基因在斑石鲷遗传性别鉴定中的应用。
4.一种鉴定斑石鲷RhoGEF10基因重组的方法，其特征在于，
（1）PCR扩增：取待测斑石鲷，提取基因组DNA；以所得基因组DNA为模板，采用斑石鲷RhoGEF10基因特异性引物对，进行PCR扩增，并将所得PCR扩增产物与权利要求1所述的斑石鲷RhoGEF10重组基因与非重组的特异性标记进行对比；
（2）结果判断：若从待测斑石鲷的基因组DNA中扩增出326bp和879bp两个DNA片段，即待测斑石鲷中RhoGEF10基因发生重组；
若从待测斑石鲷的基因组DNA中仅扩增出326bp单一DNA片段，即待测斑石鲷中RhoGEF10基因未发生重组；
所述斑石鲷RhoGEF10基因特异性引物对为：
ChRho_F:1 : 5’-CAACTACCACTCTGAATGCTGC-3’；
ChRho_R:2 : 5’-GTTCAACCACCACACTTTAGGC-3’。
5.一种鉴定斑石鲷雌雄遗传性别的方法，其特征在于，
（1）PCR扩增：取待测斑石鲷，提取基因组DNA；以所得基因组DNA为模板，采用斑石鲷RhoGEF10基因特异性引物对，进行PCR扩增，并将所得PCR扩增产物与权利要求1所述的斑石鲷RhoGEF10重组基因与非重组的特异性标记进行对比；
（2）结果判断：从待测斑石鲷的基因组DNA中扩增出326bp和879bp两个DNA片段，即待测斑石鲷中RhoGEF10基因发生重组，该待测斑石鲷为雄性个体X1X2Y；
或，从待测斑石鲷的基因组DNA中仅扩增出326bp单一DNA片段，即待测斑石鲷中RhoGEF10基因未发生重组，该待测斑石鲷为雌性个体X1X1X2X2；
所述斑石鲷RhoGEF10基因特异性引物对为：
ChRho_F:1 : 5’-CAACTACCACTCTGAATGCTGC-3’；
ChRho_R:2 : 5’-GTTCAACCACCACACTTTAGGC-3’。
6.一种检测斑石鲷雌雄遗传性别的特异性引物，其特征在于，
ChRho_F:1 : 5’-CAACTACCACTCTGAATGCTGC-3’；
ChRho_R:2 : 5’-GTTCAACCACCACACTTTAGGC-3’。
7.一种鉴定斑石鲷雌雄遗传性别的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒含权利要求6所述的遗传性别特异性引物。
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