[发明专利]一种斑石鲷RhoGEF10重组基因及性别鉴定方法和试剂盒

说明书

本发明涉及基因重组技术领域，具体说是一种斑石鲷RhoGEF10重组基因及性别鉴定方法和试剂盒。斑石鲷RhoGEF10重组基因为斑石鲷RhoGEF10基因SEQ ID NO:1中第55位点和56位点之间插入DNA片段获得斑石鲷RhoGEF10重组基因。本发明获得斑石鲷X和Y染色体RhoGEF10基因同源区段且有大片段DNA插入重组标记序列，建立斑石鲷重组RhoGEF10基因快速检测方法，采用该方法可以快速、准确和高效的鉴定待检测斑石鲷RhoGEF10基因是否发生重组，缩短斑石鲷RhoGEF10基因重组准确鉴定时间，提升检测效率，并利用其进行雌雄性别鉴定、高雄苗种制备和家系选育上具有重要的意义和应用价值。

技术领域

本发明涉及基因重组技术领域，具体说是一种斑石鲷RhoGEF10重组基因及性别鉴定方法和试剂盒。

背景技术

斑石鲷隶属于鲈形目（Perciformes），石鲷科（Oplegnathidae），石鲷属（Oplegnathus），主要分布于西太平洋温热带海域，由于斑石鲷具有摄食贝壳食性特点，可以清理养殖网箱网衣，节约了大量的人力资源和网衣清理成本，经济效益和生态效益极其显著。斑石鲷又是我国本土自然种类，对其资源开发及可持续利用具长效性，养殖前景广阔。斑石鲷雌鱼染色体核型为2n=48，遗传性别类型为（X₁X₁X₂X₂）；雄鱼染色体核型为2n=47，含有1条巨大的异形染色体，遗传性别类型为（X₁X₂Y）（薛蕊，安皓，刘清华，肖志忠，王彦丰，李军. 斑石鲷（Oplegnathus punctatus）雌、雄鱼核型及Ag-NORs带型分析. 海洋与湖沼，2016，47(3)：626-632）。石鲷科鱼类在养殖过程中存在显著的雌雄生长二态性，雄鱼生长速度快于雌鱼，斑石鲷高雄苗种和全雄苗种的制备将促进斑石鲷养殖产业的提质增效，开展斑石鲷苗种遗传性别快速鉴定技术的研发将有助于斑石鲷优良雄性种质的储备（肖志忠.条石鲷种群遗传学及养殖生物学研究. 中国海洋大学，博士论文，2015）。

插入或缺失多态性是一种分子标记，是DNA或者蛋白质序列水平上发生频率仅次于残基替换的改变，主要表现为基因组中插入或者缺失了不同大小的片段化DNA。随着比较基因组学的深入研究，插入或缺失多态性标记的挖掘为遗传育种应用研究提供了重要的生物信息。目前，该技术开发研究主要集中在人类疾病、农作物以及畜禽生长性状等具备全基因组信息的物种和类群上，在海洋动物上的研究和应用起步较晚和应用甚少。由此，对海洋鱼类的功能性基因的插入或缺失标记研究亟待开拓和深入。