[发明专利]一种通过A2B5+胶质瘤细胞致敏的树突状细胞疫苗在审
申请号: | 202210094399.9 | 申请日: | 2022-01-26 |
公开(公告)号: | CN114209820A | 公开(公告)日: | 2022-03-22 |
发明(设计)人: | 李晨蔚;周慧斌;邓婷婷;周冰逸;胡雪 | 申请(专利权)人: | 上海尚泰生物技术有限公司 |
主分类号: | A61K39/00 | 分类号: | A61K39/00;A61K35/17;A61K35/15;A61P35/00;C12N5/0784;C12N5/0783;C07K14/47 |
代理公司: | 上海一平知识产权代理有限公司 31266 | 代理人: | 徐迅;崔佳佳 |
地址: | 200433 上海市杨*** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 通过 a2b5 胶质 细胞 树突 疫苗 | ||
1.一种靶向A2B5阳性肿瘤的树突状细胞的制备方法,其特征在于,所述方法包括步骤:
(a)制备A2B5阳性肿瘤干细胞抗原;和
(b)将步骤(a)中获得的A2B5阳性肿瘤干细胞抗原与未成熟树突状细胞共孵育,诱导树突状细胞成熟,从而获得所述的靶向A2B5阳性肿瘤的树突状细胞。
2.一种制备A2B5阳性肿瘤干细胞抗原的方法,所述A2B5阳性肿瘤干细胞抗原被用于如权利要求1所述的制备方法,其特征在于,所述方法包括步骤:
(a)消化及裂解胶质瘤组织,从而获得单细胞悬液;
(b)收集步骤(a)中获得的单细胞悬液,用磁珠分选从而获得A2B5+胶质瘤干细胞;和
(c)将步骤(b)获得的A2B5+胶质瘤干细胞用γ射线进行辐照,再用研磨仪破碎细胞,从而获得A2B5阳性肿瘤干细胞抗原。
3.一种靶向A2B5阳性肿瘤的树突状细胞,其特征在于,所述树突状细胞由如权利要求1所述的制备方法获得。
4.一种靶向A2B5阳性肿瘤的细胞毒性T淋巴细胞,其特征在于,所述细胞毒性T淋巴细胞由如权利要求3所述的树突状细胞进行致敏反应而获得。
5.一种制备如权利要求4所述的细胞毒性T淋巴细胞的方法,其特征在于,包括步骤:
(a)采用磁珠负选法从PBMC中分离CD3+T淋巴细胞;和
(b)以1:(1~10)的比例将如权利要求3所述的树突状细胞与步骤(a)获得的CD3+T淋巴细胞共培养,从而致敏CD3+T淋巴细胞,获得如权利要求4所述的细胞毒性T淋巴细胞;
任选地,所述方法还可包括步骤:
(c)进行多轮致敏,即多次重复步骤(b)以获得敏感性更高的如权利要求4所述的细胞毒性T淋巴细胞;或
(d)扩大培养步骤(b)中获得的如权利要求4所述的细胞毒性T淋巴细胞;或
(e)对所获的如权利要求4所述所述的细胞毒性T淋巴细胞进行流式分析。
6.一种A2B5阳性肿瘤预防性或治疗性疫苗,其特征在于,所述疫苗含有下组的成分:
(i)如权利要求3所述的树突状细胞,或如权利要求4所述的细胞毒性T淋巴细胞,或其组合;和
(ii)药学上可接受的载体、稀释剂或赋形剂。
7.一种制备预防性或治疗性疫苗的方法,其特征在于,包括步骤:将安全有效量的如权利要求3所述的树突状细胞,或如权利要求4所述的细胞毒性T淋巴细胞与药学上可接受的载体、稀释剂或赋形剂进行混合,从而形成预防性或治疗性疫苗。
8.一种细胞制剂,其特征在于,所述细胞制剂含有如权利要求3所述的树突状细胞,或如权利要求4所述的细胞毒性T淋巴细胞,以及药学上可接受的载体、稀释剂或赋形剂。
9.一种活性成分的用途,所述活性成分选自下组:如权利要求3所述的树突状细胞,或如权利要求4所述的细胞毒性T淋巴细胞,或如权利要求8所述的细胞制剂,或其组合,其特征在于,用于制备特异性杀伤肿瘤的药物或制剂。
10.一种药物组合物,所述药物组合物包括下组的成分:
(1)如权利要求3所述的树突状细胞,或如权利要求4所述的细胞毒性T淋巴细胞,或如权利要求8所述的细胞制剂,或其组合;和
(2)选自下组的联用部分:胶质瘤治疗药物、细胞毒性药物、放射性核素、毒素、可检测标记物、前药激活酶,或其组合。
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