[发明专利]非洲猪瘟病毒检测用生物材料、试剂盒和非诊断目的的非洲猪瘟病毒的检测方法

权利要求书

1.一种非洲猪瘟病毒检测用生物材料，包括独立包装的第一材料和第二材料；

所述第一材料包括非洲猪瘟病毒捕获探针和与所述非洲猪瘟病毒捕获探针化学结合的AuNPs@ZnFe₂O₄@COF材料；所述AuNPs@ZnFe₂O₄@COF材料包括ZnFe₂O₄@COF和负载于所述ZnFe₂O₄@COF表面的金纳米粒子；

所述第二材料包括负载有非洲猪瘟病毒标记探针和辅助探针的CuO₂；

所述非洲猪瘟病毒捕获探针的核苷酸序列为：5’-tcaaagcaaaggtaatcatcatcgc-3’-(CH₂)₆-SH；

所述非洲猪瘟病毒标记探针的核苷酸序列为：5’-tcgagttacgctaagcactgggttggtattcctcc-3’-(CH₂)₆-SH；

所述辅助探针的核苷酸序列为：5’-cttagcgtaactcgaggaggaataccaacccagtg-3’。

2.根据权利要求1所述的非洲猪瘟病毒检测用生物材料，其特征在于，所述第一材料的制备方法包括以下步骤：

将非洲猪瘟病毒捕获探针与AuNPs@ZnFe₂O₄@COF材料混合，进行化学结合，得到第一材料。

3.根据权利要求1所述的非洲猪瘟病毒检测用生物材料，其特征在于，所述第二材料的制备方法包括以下步骤：

将非洲猪瘟病毒标记探针、辅助探针和CuO₂混合，进行化学结合，得到第二材料。

4.一种非洲猪瘟病毒检测用试剂盒，包括权利要求1~3任意一项所述的非洲猪瘟病毒检测用生物材料和CuO₂的显色底物。

5.一种非诊断目的的非洲猪瘟病毒的检测方法，包括以下步骤：

1）将权利要求1~3任意一项所述的非洲猪瘟病毒检测用生物材料中的第一材料和待测样本混合，进行第一孵育，去除未结合物，得到第一孵育产物；

2）向所述第一孵育产物中加入权利要求1~3任意一项所述的非洲猪瘟病毒检测用生物材料中的第二材料，进行第二孵育，去除未结合物，得到第二孵育产物；

3）向所述第二孵育产物中加入CuO₂的显色底物，进行第三孵育，测试所得第三孵育液在510 nm处的吸光值；

根据预定的标准曲线和所述吸光值，获得待测样品中非洲猪瘟病毒的浓度；所述标准曲线为非洲猪瘟病毒浓度的对数与510 nm吸光值的线性关系曲线。

6.根据权利要5所述的非诊断目的的非洲猪瘟病毒检测方法，其特征在于，所述步骤1）或步骤2）中，所述去除未结合物的方式包括：

对第一孵育或第二孵育后所得孵育液进行磁力吸附分离，得到上清液和下层浊液；

对下层浊液进行洗涤。

7.根据权利要求5所述的非诊断目的的非洲猪瘟病毒检测方法，其特征在于，步骤1）中，所述第一孵育的时间为30~60min。

8.根据权利要求5所述的非诊断目的的非洲猪瘟病毒检测方法，其特征在于，步骤2）中，所述第二孵育的时间为30~60min。

9.根据权利要求5所述的非诊断目的的非洲猪瘟病毒检测方法，其特征在于，步骤3）中，所述第三孵育的温度为50~60℃；所述第三孵育的时间为15~30min。