[发明专利]非洲猪瘟病毒检测用生物材料、试剂盒和非诊断目的的非洲猪瘟病毒的检测方法

说明书

本发明提供了非洲猪瘟病毒检测用生物材料、试剂盒和非诊断目的的非洲猪瘟病毒的检测方法，属于分子检测技术领域；所述非洲猪瘟病毒检测用生物材料，包括与非洲猪瘟病毒捕获探针化学结合的AuNPs@ZnFesubgt;2/subgt;Osubgt;4/subgt;@COF材料以及负载有非洲猪瘟病毒标记探针和辅助探针的CuOsubgt;2/subgt;。本发明的非洲猪瘟病毒检测用生物材料能够特异性结合非洲猪瘟病毒并显色，能够用于检测非洲猪瘟病毒。

技术领域

本发明属分子检测技术领域，具体涉及非洲猪瘟病毒检测用生物材料、试剂盒和非诊断目的的非洲猪瘟病毒的检测方法。

背景技术

非洲猪瘟病毒(ASFV,African swine fever virus)是非洲猪瘟病毒科(Asfarviridae)下仅有的种，具有传染性和极高的致病性。ASFV是所发现的仅有的虫媒DNA病毒，主要依靠软体蜱科(Argasidae)下钝缘蜱属(Ornithodoros)的软壁虱进行传播。非洲猪瘟病毒的检测对于非洲猪瘟疫情控制至关重要。

现有技术中，可用于非洲猪瘟病毒检测且不受昂贵仪器限制的常用方法有胶体金免疫层析法和酶联免疫吸附法(ELISA法)。其中，胶体金免疫层析法，操作简单、快速，但该方法的灵敏度较差，还会出现假阴性结果，存在局限性。ELISA方法操作简单，灵敏度高，但是特异性有待提高，存在假阳性结果。目前缺少一种灵敏度高且特异性强的非洲猪瘟病毒检测方法。

发明内容

有鉴于此，本发明的目的在于提供非洲猪瘟病毒检测用生物材料、试剂盒和非诊断目的的非洲猪瘟病毒的检测方法，本发明的非洲猪瘟病毒检测用生物材料用于非洲猪瘟病毒检测，灵敏度高且特异性强。

本发明提供了一种非洲猪瘟病毒检测用生物材料，包括独立包装的第一材料和第二材料；

所述第一材料包括非洲猪瘟病毒捕获探针和与所述非洲猪瘟病毒捕获探针化学结合的AuNPs@ZnFe₂O₄@COF材料；所述AuNPs@ZnFe₂O₄@COF材料包括ZnFe₂O₄@COF和负载于所述ZnFe₂O₄@COF表面的金纳米粒子；

所述第二材料包括负载有非洲猪瘟病毒标记探针和辅助探针的CuO₂。

优选的，所述第一材料的制备方法包括以下步骤：

将非洲猪瘟病毒捕获探针与AuNPs@ZnFe₂O₄@COF材料混合，进行化学结合，得到第一材料。

优选的，所述第二材料的制备方法包括以下步骤：

将非洲猪瘟病毒标记探针、辅助探针和CuO₂混合，进行化学结合，得到第二材料。

优选的，所述非洲猪瘟病毒捕获探针的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示；所述非洲猪瘟病毒标记探针的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示；所述辅助探针的核苷酸序列如SEQID NO.3所示。

本发明还提供了一种非洲猪瘟病毒检测用试剂盒，包括上述方案所述的非洲猪瘟病毒检测用生物材料和CuO₂的显色底物。

本发明还提供了一种非诊断目的的非洲猪瘟病毒的检测方法，包括以下步骤：

1)将上述方案所述的非洲猪瘟病毒检测用生物材料中的第一材料和待测样本混合，进行第一孵育，去除未结合物，得到第一孵育产物；

2)向所述第一孵育产物中加入上述方案所述的非洲猪瘟病毒检测用生物材料中的第二材料，进行第二孵育，去除未结合物，得到第二孵育产物；