[发明专利]用于控制流式点阵仪检测中发生交叉反应的方法

权利要求书

1.用于控制流式点阵仪检测中发生交叉反应的方法，包括：利用流式细胞分选技术，对荧光标记水平不均一的同一组微球，根据各微球所带荧光素水平的差异，进行限制性分选，分选出荧光标记水平均一、荧光强度分布集中、离散度小的部分微球，和其他组别的、同样经过分选的荧光微球，组合成新的多重荧光编码微球进行检测。

2.根据权利要求1所述的用于控制流式点阵仪检测中发生交叉反应的方法，其特征在于，所述限制性分选包括根据微球在前向散射光FSC和/或侧向散射光SSC的分布数据进行分选。

3.根据权利要求2所述的用于控制流式点阵仪检测中发生交叉反应的方法，其特征在于，若出现微球在象限中分布不集中，部分微球离散于主群落四周的情况，则根据FSC数据，建立分选门，分选出群落中心区域集中的微球群落，而离散于群落周围的直径小于或者大于设定的标准尺寸的微球以及两个或多个微球粘连体则被不被选中。

4.根据权利要求2所述的用于控制流式点阵仪检测中发生交叉反应的方法，其特征在于，若出现微球在象限中分布不集中，部分微球离散于主群落四周的情况，则根据SSC数据分布，分选出集中于群落中心的颗粒密度和内部复杂程度一致的微球，而离散于群落周围的内部性质差异度大的微球则不被选中。

5.根据权利要求2所述的用于控制流式点阵仪检测中发生交叉反应的方法，其特征在于，所述限制性分选还包括根据微球标记的荧光素的种类的不同，选择适合该波长的检测通道。

6.根据权利要求3，4或5所述的用于控制流式点阵仪检测中发生交叉反应的方法，其特征在于，根据微球在FSC/SSC通道，以及在不同荧光素对应的检测通道上的分布情况，综合考虑微球大小和颗粒度，以及荧光素标记的荧光强度相对均一和集中的趋势，按照所需目的微球的数量，选择微球群落中心附近的区域作为分选目标。

7.根据权利要求1-5任意一项所述的用于控制流式点阵仪检测中发生交叉反应的方法，其特征在于，多重荧光标记的微球采取多种荧光素联合分选的方式，结合或不结合FSC/SSC的分选，最终选择性分选出荧光素、微球大小、微球颗粒性质比分选前更具均一性的一组微球，用于制备成多重微球的检测试剂来源。

8.根据权利要求1所述的用于控制流式点阵仪检测中发生交叉反应的方法，其特征在于，还包括对限制性分选后得到的微球进行有效性检测，包括：

1)将分选出来的微球，混匀后，重新在流式点阵仪上检测；

2)观察被分选微球在其标记的一个或多个荧光素的检测通道上，不同微球荧光强度的分布情况，比对其分选前后在不同荧光通道的离散度，具体分析荧光信号限制性分选后的微球，是否有跨区域漂移至邻近微球的荧光信号区域，而导致与邻近微球的交叉反应。