[发明专利]一种中和抗体的检测方法和试剂盒在审

专利信息
申请号: 202210116181.9 申请日: 2022-01-28
公开(公告)号: CN114460287A 公开(公告)日: 2022-05-10
发明(设计)人: 胡小龙;屈武斐;周丽 申请(专利权)人: 上海八通生物科技股份有限公司
主分类号: G01N33/543 分类号: G01N33/543;G01N33/68;G01N33/532;G01N33/558;B82Y40/00;B82Y35/00
代理公司: 上海专利商标事务所有限公司 31100 代理人: 韦东
地址: 200231 上海市徐*** 国省代码: 上海;31
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摘要:
搜索关键词: 一种 中和 抗体 检测 方法 试剂盒
【权利要求书】:

1.一种处理碳纳米材料的方法,包括以下步骤:

(1)在表面活性剂存在的条件下对溶剂中的碳纳米材料超声,得到纳米碳分散体,

任选的(2)分离和/或洗涤纳米碳;

优选地,所述溶剂是极性溶剂,例如水,

优选地,所述表面活性剂选自以下的一种或多种:Triton X-100、Tween-20、Tetronic1307、S17、PEG与PVP,

优选地,碳纳米材料包括碳纳米管、碳纳米球。

2.如权利要求1所述的方法,所述方法还包含选自以下的一项或多项特征,

所述表面活性剂的浓度为0.1-3%,

碳纳米材料在溶剂中的浓度为1-30mg/mL,

步骤(1)中的超声的功率是80-200W,

步骤(1)中的超声的时间为1-3小时,

所述方法还在步骤(1)之后包含用400nm吸光度测定分散体稳定性的步骤,

步骤(2)的分离纳米碳包括离心步骤,

步骤(2)的洗涤纳米碳包括使用洗涤剂重悬和分离纳米碳的过程。

3.一种制备纳米碳偶联物的方法,包括以下步骤:

(1)在表面活性剂存在的条件下对溶剂中的碳纳米材料超声,得到纳米碳分散体;

(2)分离和/或洗涤纳米碳;

(3)活化纳米碳;

(4)在偶联液中混合纳米碳和抗原物并孵育,得到偶联物,

所述方法还包含选自以下的一项或多项特征,

所述溶剂是极性溶剂,例如水,

所述表面活性剂选自以下的一种或多种:Triton X-100、Tween-20、Tetronic 1307、S17、PEG与PVP,

所述表面活性剂的浓度为0.1-3%,

所述碳纳米材料包括碳纳米管、碳纳米球,

碳纳米材料在溶剂中的浓度为1-30mg/mL,

步骤(1)中的超声的功率是80-200W,

步骤(1)中的超声的时间为1-3小时,

步骤(2)的分离纳米碳包括离心,

步骤(2)的洗涤纳米碳包括使用洗涤剂重悬和分离纳米碳的过程。

4.如权利要求3所述的方法,其特征在于,

步骤(3)中使用EDC和NHS活化纳米碳,

纳米碳与EDC和NHS的重量比为0.5-2:0.5-2:0.5-2,

活化的时间是20-50min,

所述活化在偶联液中进行。

5.如权利要求3所述的方法,其特征在于,

步骤(4)中的偶联液中纳米碳和抗原物的重量比为30:1至10:1,

步骤(4)中的孵育时间是20-50min,

所述偶联液含有2-吗啉乙磺酸,

所述偶联液中2-吗啉乙磺酸的浓度是1-200mM,

所述偶联液的pH值是5.0-7.0,

与纳米碳偶联的抗原物是具有免疫原性的蛋白、多糖或核酸;优选地,所述抗原物是抗体或病毒抗原;更优选地,所述抗原物是新冠病毒的S-RBD或鼠IgG。

6.如权利要求3所述的方法,其特征在于,

所述方法还包含步骤:将偶联液中未偶联的纳米碳封闭,

所述方法还包含步骤:将纳米碳偶联物悬于纳米碳保存液中,

所述纳米碳保存液含有Tris,优选还含有牛血清白蛋白。

7.一种制备纳米碳检测制品的方法,所述方法包括:将权利要求3-5中任一项所述的方法制备的纳米碳偶联物分布在固相载体上,

所述检测制品用于检测中和抗体,所述中和抗体优选是新冠病毒的中和抗体,

所述固相载体是玻璃纤维,

所述检测制品是检测卡,

所述检测卡包括:样品垫、结合垫、检测垫,其中分布有纳米碳偶联物的固相载体位于结合垫。

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