[发明专利]一种中和抗体的检测方法和试剂盒在审
申请号: | 202210116181.9 | 申请日: | 2022-01-28 |
公开(公告)号: | CN114460287A | 公开(公告)日: | 2022-05-10 |
发明(设计)人: | 胡小龙;屈武斐;周丽 | 申请(专利权)人: | 上海八通生物科技股份有限公司 |
主分类号: | G01N33/543 | 分类号: | G01N33/543;G01N33/68;G01N33/532;G01N33/558;B82Y40/00;B82Y35/00 |
代理公司: | 上海专利商标事务所有限公司 31100 | 代理人: | 韦东 |
地址: | 200231 上海市徐*** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 中和 抗体 检测 方法 试剂盒 | ||
1.一种处理碳纳米材料的方法,包括以下步骤:
(1)在表面活性剂存在的条件下对溶剂中的碳纳米材料超声,得到纳米碳分散体,
任选的(2)分离和/或洗涤纳米碳;
优选地,所述溶剂是极性溶剂,例如水,
优选地,所述表面活性剂选自以下的一种或多种:Triton X-100、Tween-20、Tetronic1307、S17、PEG与PVP,
优选地,碳纳米材料包括碳纳米管、碳纳米球。
2.如权利要求1所述的方法,所述方法还包含选自以下的一项或多项特征,
所述表面活性剂的浓度为0.1-3%,
碳纳米材料在溶剂中的浓度为1-30mg/mL,
步骤(1)中的超声的功率是80-200W,
步骤(1)中的超声的时间为1-3小时,
所述方法还在步骤(1)之后包含用400nm吸光度测定分散体稳定性的步骤,
步骤(2)的分离纳米碳包括离心步骤,
步骤(2)的洗涤纳米碳包括使用洗涤剂重悬和分离纳米碳的过程。
3.一种制备纳米碳偶联物的方法,包括以下步骤:
(1)在表面活性剂存在的条件下对溶剂中的碳纳米材料超声,得到纳米碳分散体;
(2)分离和/或洗涤纳米碳;
(3)活化纳米碳;
(4)在偶联液中混合纳米碳和抗原物并孵育,得到偶联物,
所述方法还包含选自以下的一项或多项特征,
所述溶剂是极性溶剂,例如水,
所述表面活性剂选自以下的一种或多种:Triton X-100、Tween-20、Tetronic 1307、S17、PEG与PVP,
所述表面活性剂的浓度为0.1-3%,
所述碳纳米材料包括碳纳米管、碳纳米球,
碳纳米材料在溶剂中的浓度为1-30mg/mL,
步骤(1)中的超声的功率是80-200W,
步骤(1)中的超声的时间为1-3小时,
步骤(2)的分离纳米碳包括离心,
步骤(2)的洗涤纳米碳包括使用洗涤剂重悬和分离纳米碳的过程。
4.如权利要求3所述的方法,其特征在于,
步骤(3)中使用EDC和NHS活化纳米碳,
纳米碳与EDC和NHS的重量比为0.5-2:0.5-2:0.5-2,
活化的时间是20-50min,
所述活化在偶联液中进行。
5.如权利要求3所述的方法,其特征在于,
步骤(4)中的偶联液中纳米碳和抗原物的重量比为30:1至10:1,
步骤(4)中的孵育时间是20-50min,
所述偶联液含有2-吗啉乙磺酸,
所述偶联液中2-吗啉乙磺酸的浓度是1-200mM,
所述偶联液的pH值是5.0-7.0,
与纳米碳偶联的抗原物是具有免疫原性的蛋白、多糖或核酸;优选地,所述抗原物是抗体或病毒抗原;更优选地,所述抗原物是新冠病毒的S-RBD或鼠IgG。
6.如权利要求3所述的方法,其特征在于,
所述方法还包含步骤:将偶联液中未偶联的纳米碳封闭,
所述方法还包含步骤:将纳米碳偶联物悬于纳米碳保存液中,
所述纳米碳保存液含有Tris,优选还含有牛血清白蛋白。
7.一种制备纳米碳检测制品的方法,所述方法包括:将权利要求3-5中任一项所述的方法制备的纳米碳偶联物分布在固相载体上,
所述检测制品用于检测中和抗体,所述中和抗体优选是新冠病毒的中和抗体,
所述固相载体是玻璃纤维,
所述检测制品是检测卡,
所述检测卡包括:样品垫、结合垫、检测垫,其中分布有纳米碳偶联物的固相载体位于结合垫。
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