[发明专利]一种非洲猪瘟单克隆抗体及其制备方法和应用

权利要求书

1.一种非洲猪瘟病毒单克隆抗体，其特征在于，所述的单克隆抗体能特异性结合非洲猪瘟病毒P72蛋白，所述的单克隆抗体的的重链可变区序列如SEQ ID NO.2所示，所述的单克隆抗体的轻链可变区序列如SEQ ID NO.3所示。

2.根据权利要求1所述的单克隆抗体，其特征在于，所述的单克隆抗体结合的抗原表位位于非洲猪瘟病毒P72的aa487-aa498位。

3.根据权利要求2所述的单克隆抗体，其特征在于，所述的非洲猪瘟病毒P72的aa487-aa498位氨基酸序列为WHKFGHVVNAIM。

4.一种制备如权利要求1所述的单克隆抗体的方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：

1)非洲猪瘟病毒P72蛋白的制备；

2)特异性表达抗非洲猪瘟病毒P72蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞的制备；

3)使用步骤2)制备的杂交瘤细胞制备小鼠腹水，从腹水中纯化抗非洲猪瘟病毒P72蛋白单克隆抗体。

5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，所述的步骤1)中制备非洲猪瘟病毒P72蛋白时，表达P72蛋白的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。

6.一种用于检测非洲猪瘟病毒抗体的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包括有效量的权利要求1所述的单克隆抗体和有效量的权利要求4所制备的非洲猪瘟病毒P72蛋白；以及对非洲猪瘟病毒抗体反应进行检测的检测试剂。

7.根据权利要求6所述的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒为阻断ELISA检测试剂盒，所述阻断ELISA检测试剂盒包括包被有权利要求4所制备的非洲猪瘟病毒P72蛋白的包被板、HRP标记权利要求1所述的单克隆抗体、样品稀释液、25×浓缩洗涤液、阳性对照、阴性对照、显色液、终止液。

8.根据权利要求7所述的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒中权利要求4所制备的非洲猪瘟病毒P72蛋白包被浓度为1μg/ml，100μl/孔；所述的HRP标记权利要求1所述的单克隆抗体的使用稀释比例为1:30000倍，100μl/孔。