[发明专利]一种高效液相色谱-串联质谱检测人血浆中来曲唑的方法

说明书

本发明涉及来曲唑检测的技术领域，尤其涉及一种高效液相色谱‑串联质谱检测人血浆中来曲唑的方法，具体包括将样本进行蛋白沉淀后，依次进行涡旋振荡、离心分离，取上清液，进行高效液相色谱‑串联质谱的检测。本发明采用蛋白沉淀法对血浆样本进行前处理，其步骤简单，内源性杂质峰的干扰作用小，无需液液萃取后进行氮吹并重新溶解的步骤。通过高效液相色谱‑串联质谱法，进行梯度分离，在3.5分钟内完成检测，具有分离度好、专一性强的优点，并且节约检测时间。本发明的方法的灵敏度高，血样样本中来曲唑的线性范围为0.5000ng/mL~250.0ng/mL。通过对方法学评价试验，表明本发明的检测方法具有准确度、精密度和选择性好、无明显基质效应的优点。

【技术领域】

本发明涉及来曲唑检测的技术领域，尤其涉及一种高效液相色谱-串联质谱检测人血浆中来曲唑的方法。

【背景技术】

来曲唑(letrozole)是一种非甾体类芳香酶抑制剂，其通过抑制芳香化酶，使雌激素水平下降，从而消除雌激素对肿瘤生长的刺激作用，用于乳腺癌的内分泌治疗。在美国药典(USP)27版中，来曲唑含量采用高效液相色谱法法进行检测。高效液相色谱法显示出相对较高的定量下限（LLOQ）和线性范围，其定量下限约为2μg/mL，线性范围约在2μg/mL~100μg/mL。而现有的高效液相色谱-串联质谱方法是基于液-液提取法的样品前处理程序，前处理的步骤繁琐、血浆用量大。

【发明内容】

本发明的目的在于提供一种高效液相色谱-串联质谱检测人血浆中来曲唑的方法，采用一步法蛋白沉淀样品，通过高效液相色谱-串联质谱检测，实现灵敏、快速检测的目的。

为实现上述目的，本发明采用了如下技术方案：

一种高效液相色谱-串联质谱检测人血浆中来曲唑的方法，其特征在于：包括如下步骤，

样品的制备：取血浆样品加入样品管中，加入内标物来曲唑-d₄溶液，加入乙腈沉淀蛋白，依次进行涡旋振荡、离心分离，取上清液；

液相条件：

色谱柱为Waters Xbridge C18 (50mm×2.1mm, 3.5μm)，流动相A：0.1%甲酸的水溶液、流动相B：甲醇，流速为0.60mL/min，柱温为40℃，进样体积为5μL，运行时间为3.5min；梯度洗脱程序如下：