[发明专利]一种核酸检测方法在审
申请号: | 202210127120.2 | 申请日: | 2022-02-11 |
公开(公告)号: | CN114480572A | 公开(公告)日: | 2022-05-13 |
发明(设计)人: | 方剑秋;沙海天;袁梦瑶;白艳军 | 申请(专利权)人: | 万子健生物技术(上海)有限公司 |
主分类号: | C12Q1/6804 | 分类号: | C12Q1/6804;C12Q1/6844;C12Q1/686 |
代理公司: | 上海浦一知识产权代理有限公司 31211 | 代理人: | 戴广志 |
地址: | 201821 上海市嘉定*** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 核酸 检测 方法 | ||
1.一种核酸检测方法,其特征在于,包括如下步骤:
1)待测核酸序列的扩增:所用的正向引物和反向引物均为带有标记物的特异性扩增引物,扩增产物为双链DAN产物,所述双链DNA产物两端均带有标记物;
2)对扩增的双链DNA产物进行检测:所用检测工具为层析试纸条,所述层析试纸条含有显色物,所述显色物附着有能够与步骤1)中的标记物结合的配对标记物,检测温度为室温,检测结果通过层析试纸条的显色判断;
所述层析试纸条自样品端至手柄端依次形成有显色物线、靶标检测线和质控检测线;
仅当标靶检测线和质控检测线均显色时,判断为阳性。
2.如权利要求1所述的检测方法,其特征在于,步骤1)中所述正向引物和反向引物的标记物为荧光素或生物素。
3.如权利要求1所述的检测方法,其特征在于,步骤2)中所述配对标记物通过电荷吸附或功能基团偶联的方式附着于所述显色物的表面。
4.如权利要求3所述的检测方法,其特征在于,步骤2)中的所述配对标记物为荧光素或生物素抗体。
5.如权利要求4所述的检测方法,其特征在于,步骤2)中的所述显色物为金胶体或荧光微球或彩色微球或量子点中的其中之一。
6.如权利要求1所述的检测方法,其特征在于,步骤1)中的扩增采用PCR扩增技术或等温扩增技术中的其中之一。
7.如权利要求1至6任一项所述的检测方法,其特征在于,所述显色物线位于所述层析试纸条的样品垫区域。
8.如权利要求1至6任一项所述的检测方法,其特征在于,所述层析试纸条含有多条所述靶标检测线以检测不同的待测核酸序列。
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