[发明专利]一种联合检测多种呼吸道病毒的PCR引物组及试剂盒在审
申请号: | 202210129994.1 | 申请日: | 2022-02-11 |
公开(公告)号: | CN114262759A | 公开(公告)日: | 2022-04-01 |
发明(设计)人: | 张祥林;张劲松;侯艳雯;魏鹏;胡秋萍 | 申请(专利权)人: | 重庆巴斯德生物医药科技有限公司 |
主分类号: | C12Q1/70 | 分类号: | C12Q1/70;C12Q1/686;C12N15/11;C12R1/93 |
代理公司: | 上海光华专利事务所(普通合伙) 31219 | 代理人: | 王秋霞;许亦琳 |
地址: | 400700 重*** | 国省代码: | 重庆;50 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 联合 检测 多种 呼吸道 病毒 pcr 引物 试剂盒 | ||
1.一种联合检测多种呼吸道病毒的PCR引物组,其特征在于,所述PCR引物组包括甲型流感病毒检测引物对、甲型流感病毒H1N1检测引物对、甲型流感病毒H3N2检测引物对、乙型流感病毒检测引物对、人呼吸道合胞病毒检测引物对、人偏肺病毒检测引物对、鼻病毒和肠道病毒检测引物对。
2.根据权利要求1所述的PCR引物组,其特征在于,所述引物组还包括以下特征:
1)甲型流感病毒检测引物对:包括核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示的上游引物和核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示的下游引物;
2)甲型流感病毒H1N1检测引物对:包括核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示的上游引物和核苷酸序列如SEQ ID NO.4所示的下游引物;
3)甲型流感病毒H3N2检测引物对:包括核苷酸序列如SEQ ID NO.5所示的上游引物和核苷酸序列如SEQ ID NO.6所示的下游引物;
4)乙型流感病毒检测引物对:包括核苷酸序列如SEQ ID NO.7所示的上游引物和核苷酸序列如SEQ ID NO.8所示的下游引物;
5)人呼吸道合胞病毒检测引物对:包括核苷酸序列如SEQ ID NO.9所示的上游引物和核苷酸序列如SEQ ID NO.10所示的下游引物;
6)人偏肺病毒检测引物对:包括核苷酸序列如SEQ ID NO.11所示的上游引物和核苷酸序列如SEQ ID NO.12所示的下游引物;
7)鼻病毒和肠道病毒检测引物对:包括核苷酸序列如SEQ ID NO.13所示的上游引物和核苷酸序列如SEQ ID NO.14所示的下游引物。
3.权利要求1或2所述的PCR引物组在制备检测甲型流感病毒、甲型流感病毒H1N1、甲型流感病毒H3N2、乙型流感病毒、人呼吸道合胞病毒、人偏肺病毒、鼻病毒和肠道病毒的试剂盒中的用途。
4.一种联合检测甲型流感病毒、甲型流感病毒H1N1、甲型流感病毒H3N2、乙型流感病毒、人呼吸道合胞病毒、人偏肺病毒、鼻病毒和肠道病毒的试剂盒,所述试剂盒中包括多重RT-PCR反应物,所述多重RT-PCR反应物中包括权利要求1或2所述的PCR引物组。
5.根据权利要求4所述的试剂盒,其特征在于,所述多重RT-PCR反应物中还包括OneStep RT-PCR Enzyme MIX和/或外源RNA内参扩增引物对。
6.根据权利要求5所述的试剂盒,其特征在于,所述外源RNA内参扩增引物对包括核苷酸序列如SEQ ID NO.15所示的上游引物和核苷酸序列如SEQ ID NO.16所示的下游引物。
7.根据权利要求5所述的试剂盒,其特征在于,以所述多重RT-PCR反应物的总体积为基准,所述多重RT-PCR反应物中每条引物的浓度为50nmol/L~600nmol/L。
8.根据权利要求4所述的试剂盒,其特征在于,所述试剂盒中还包括样品RNA提取试剂、阳性质控品、阴性质控品中的任一项或多项。
9.根据权利要求8所述的试剂盒,其特征在于,所述阳性质控品为含各目标病毒特异核酸片段和外源RNA内参特异核酸片段的质粒DNA,和/或,所述阴性质控品为TE缓冲液。
10.根据权利要求9所述的试剂盒,其特征在于,所述阳性质控品各质粒DNA的核苷酸序列如SEQ ID NO.17~24所示。
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