[发明专利]一种联合检测多种呼吸道病毒的PCR引物组及试剂盒

说明书

本发明涉及生物技术领域，特别是涉及一种联合检测多种呼吸道病毒的PCR引物组及试剂盒，所述PCR引物组包括甲型流感病毒检测引物对、甲型流感病毒H1N1检测引物对、甲型流感病毒H3N2检测引物对、乙型流感病毒检测引物对、人呼吸道合胞病毒检测引物对、人偏肺病毒检测引物对、鼻病毒/肠道病毒检测引物对。所述试剂盒中包括多重RT‑PCR反应物，所述多重RT‑PCR反应物中包括所述PCR引物组。本发明的引物组和试剂盒可以联合检测并鉴定七种呼吸道病毒，该方法操作简单、检测准确、灵敏高，特异性高，显著缩短检测时间，可以实现2‑3小时内可出检测结果。

技术领域

本发明涉及生物技术领域，特别是涉及一种联合检测多种呼吸道病毒的PCR引物组及试剂盒。

背景技术

呼吸道感染的发病率、死亡率、住院率和医疗负担均较高，呼吸道病毒如流感病毒和人呼吸道合胞病毒主要原因，特别是在幼儿、孕妇、老年人和其他合并症患者中。流感病毒和人呼吸道合胞病毒也是获得性肺炎的主要病原体。除流感病毒和人呼吸道合胞病毒外，临床常见的可导致呼吸道感染的病毒还包括人偏肺病毒、鼻病毒、副流感病毒、冠状病毒、腺病毒、博卡病毒等。

目前常用的呼吸道病毒检测方法主要包括以下：病毒分离培养、病毒抗原检测、病毒抗体检测、病毒直接检测、病毒核酸检测方法等。呼吸道病毒分离培养目前仍然是病毒诊断的金标准。然而该方法存在以下缺点：(1)操作复杂繁琐，不易标准化；(2)培养周期长；(3)检测环节较多；(4)人员技术要求较高。病毒抗原检测特异度较好，阳性提示活动性病毒感染，但灵敏度较低，常有假阴性。病毒抗体检测是利用抗原与抗体的特异性反应原理进行检测，该方法灵敏性低，仅反映人体免疫反应情况，而不能反映患者真实感染情况，仅可以用于回顾性调查，但对早期诊断意义不大。病毒直接检测通过电子显微镜直接观察呼吸道标本中病毒的典型特征形态，但要求标本有大量的病毒且要求有经验的技术人员和昂贵的电子显微镜设备，操作复杂，技术要求高。病毒核酸检测方法迅猛发展，由于其快速、简便、高通量、高敏感度及高特异度的优势，成为诊断呼吸道病毒感染的主要方法。常用的检测方法是实时荧光定量PCR法。尽管其具有高特异性、敏感性和时效性，但也存在如下缺点：(1)通量低：受限于荧光通道，单管仅能检测3种病毒；(2)成本高：多种病毒同时检测，成本较高。因此，亟需开发操作简单、准确度高、通量高、检测成本低，且可以针对同一份标本检测多种呼吸道病毒的检测技术，实现快速准确检测呼吸道病毒，可以大大提高检测效率、缩短检测周期、降低检测成本，具有显著的卫生经济学与社会经济学效益，适用于临床检测、卫生防疫及流行病学调查等。

发明内容

鉴于以上所述现有技术的缺点，本发明的目的在于提供一种联合检测多种呼吸道病毒的PCR引物组及试剂盒，用于解决现有技术中的问题。

为实现上述目的及其他相关目的，本发明提供一种联合检测多种呼吸道病毒的PCR引物组，所述PCR引物组包括甲型流感病毒检测引物对、甲型流感病毒H1N1检测引物对、甲型流感病毒H3N2检测引物对、乙型流感病毒检测引物对、人呼吸道合胞病毒检测引物对、人偏肺病毒检测引物对、鼻病毒/肠道病毒检测引物对。

本发明还提供所述PCR引物组在制备检测甲型流感病毒、甲型流感病毒H1N1、甲型流感病毒H3N2、乙型流感病毒、人呼吸道合胞病毒、人偏肺病毒和鼻病毒/肠道病毒的试剂盒中的用途。

本发明还提供一种联合检测甲型流感病毒、甲型流感病毒H1N1、甲型流感病毒H3N2、乙型流感病毒、人呼吸道合胞病毒、人偏肺病毒和鼻病毒/肠道病毒的试剂盒，所述试剂盒中包括多重RT-PCR反应物，所述多重RT-PCR反应物中包括所述PCR引物组。

本发明还提供所述试剂盒在制备呼吸道病毒检测产品中的用途。