[发明专利]一种壳聚糖包埋海藻酸钙微胶囊的制备方法及镜检方法

权利要求书

1.一种壳聚糖包埋海藻酸钙微胶囊的制备方法，其特征在于，所述制备方法包括：

将预设配比的活性微生物与生物染色剂混合获得染色后活性微生物液；

将预设配比的可溶性海藻酸盐、可溶性碳酸盐、可溶性钙盐、水及染色后活性微生物液混合进行一次包埋获得染色海藻酸钙微胶囊颗粒；

将获得的所述染色海藻酸钙微胶囊颗粒加入至壳聚糖溶液获得二次包埋的壳聚糖包埋海藻酸钙微胶囊。

2.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述活性微生物为食用菌种，所述生物染色剂为番红染液或结晶紫染液；

所述将预设配比的活性微生物与生物染色剂混合获得染色后活性微生物液，包括：

将活性微生物与质量百分数为20～30％的番红染液或2.5％结晶紫染液等体积混合，染色15～30min获得染色后活性微生物液。

3.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述将预设配比的可溶性海藻酸盐、可溶性碳酸盐、可溶性钙盐、水及染色后活性微生物液混合进行一次包埋获得染色海藻酸钙微胶囊颗粒，包括：

将预设配比的可溶性海藻酸盐、可溶性碳酸盐、可溶性钙盐、水及染色后活性微生物液混合获得染色悬浮液；

将所述染色悬浮液加入至乳化剂中形成染色乳状液；

在所述染色乳状液中加入酸性乳化剂获得第一反应液；

在所述第一反应液中加入洗涤介质洗涤并分离获得染色海藻酸钙微胶囊颗粒。

4.如权利要求3所述的制备方法，其特征在于，所述将预设配比的可溶性海藻酸盐、可溶性碳酸盐、可溶性钙盐、水及染色后活性微生物液混合获得染色悬浮液，包括：

将质量比为8-12：1.8-2.2：1.8-2.2：250的可溶性海藻酸盐、可溶性碳酸盐、可溶性钙盐、水与等体积染色后活性微生物液搅拌混合均匀，在3～6°温度下静置反应1～2小时后脱气，获得染色悬浮液。

5.如权利要求3所述的制备方法，其特征在于，所述将所述染色悬浮液加入至乳化剂中形成染色乳状液，包括：

在搅拌下将所述染色悬浮液加入乳化剂中形成油包水形态的染色乳状液，所述染色悬浮液与所述乳化剂的体积比为20～30:70～80。

6.如权利要求3所述的制备方法，其特征在于，所述在所述第一反应液中加入洗涤介质洗涤并分离获得染色海藻酸钙微胶囊颗粒，包括：

搅拌下在所述第一反应液中加入洗涤介质；

通过分液漏斗分出染色海藻酸钙微胶囊层；

用生理盐水冲洗所述染色海藻酸钙微胶囊层至无油相残留，获得第二反应液；

将所述第二反应液离心分离获得染色海藻酸钙微胶囊颗粒。

7.如权利要求3～6任意一项所述的制备方法，其特征在于，所述可溶性海藻酸盐包括海藻酸钠、海藻酸钾中的至少一种；

所述可溶性碳酸盐包括碳酸钠、碳酸钾中的至少一种；

所述可溶性钙盐包括氯化钙、硝酸钙中的至少一种；

所述乳化剂包括至少一种植物油。

8.如权利要求3所述的制备方法，其特征在于，所述酸性乳化剂中酸与所述染色乳状液中CaCO₃的物质的量之比为2～4:1。

9.如权利要求1～6、8任意一项所述的制备方法，其特征在于，所述将获得的所述染色海藻酸钙微胶囊颗粒加入至壳聚糖溶液获得二次包埋的壳聚糖包埋海藻酸钙微胶囊，包括：

在搅拌下将所述染色海藻酸钙微胶囊颗粒缓慢加入至壳聚糖溶液中反应30～50min获得二次包埋的所述壳聚糖包埋海藻酸钙微胶囊溶液；

使用生理盐水清洗所述壳聚糖包埋海藻酸钙微胶囊溶液获得清洗后的壳聚糖包埋海藻酸钙微胶囊。

10.一种基于权利要求1～9任意一项所述制备方法制备的壳聚糖包埋海藻酸钙微胶囊的镜检方法，其特征在于，所述镜检方法包括：

将所述壳聚糖包埋海藻酸钙微胶囊溶于生理盐水获得待检壳聚糖包埋海藻酸钙微胶囊溶液；

将所述待检壳聚糖包埋海藻酸钙微胶囊溶液滴至载玻片上并放置于摄像显微镜下进行镜检。