[发明专利]用于川崎病检测的引物组、探针及试剂盒

权利要求书

1.一种用于川崎病检测的核酸序列组合，包括反转录引物、扩增引物和探针序列，其特征在于，所述核酸序列组合能够有效定性/定量检测人血液血小板中的miR-125a-5p、hsa-miR-3182、hsa-miR-3675-5p、miR-4433b-5p和miR-126，其中miR-126作为内参标志物；

其中，反转录引物序列如下：

miR-125a-5p-sl：CAGGGCATCAGCCTGAACCCTGAACCCTGAATAACCTGAAACTGATGCCCTGTCACAG；

hsa-miR-3182-sl：ACGGGAAACTGAGTTCAGTTCCCAGCGTCCATATCAGTTCCCAGTTTCCCGTGACTAC；

hsa-miR-3675-5p-sl：CAGGGCATCAGCCTGAACCCTGAACCCTGAATAACCTGAAACTGATGCCCTGGAAATC；

miR-4433b-5p-sl：CTTGATGGCTGCCCGTCAAGCCAGTCAAGTATCCAGTCAAGTCAGCCATCAAGACAGGA；

miR-126-sl：TTAGGGTCAGGCCTGAACCCTGAACCCTGAATGCGAACTG ACCTGACCCTAACGCATT；

扩增引物序列如下：

正向引物：

miR-125a-5p-F：CCTGAACCCTGAACCCTGA；

hsa-miR-3182-F：AGTTCAGTTCCCAGCGTCC；

hsa-miR-3675-5p-F：CCTGAACCCTGAACCCTGA；

miR-4433b-5p-F：CCCGTCAAGCCAGTCAAGT；

miR-126-F：CCTGAACCCTGAACCCTGA；

反向引物：

miR-125a-5p-R：GGTCCCTGAGACCCTTTAAC；

hsa-miR-3182-R：TGCGCGCTTCTGTAGT；

hsa-miR-3675-5p-R：CCTCTATGGGGCTTCTGTAGA；

miR-4433b-5p-R：GATGTCCCACCCCCAC；

miR-126-R：GAGCTCGTACCGTGAGTAAT；

探针序列如下：

miR-125a-5p-P：AACCTGAAACTGATGCCCTG；

hsa-miR-3182-P：ATCAGTTCCCAGTTTCCCGT；

hsa-miR-3675-5p-P：AACCTGAAACTGATGCCCTG；

miR-4433b-5p-P：CCAGTCAAGTCAGCCATCAAG；

miR-126-P：GCGAACTGACCTGACCCTAA。

2.一种用于川崎病检测的试剂盒，其特征在于，包括反转录试剂、扩增试剂和如权利要求1所述的探针序列，所述探针核苷酸序列的5’端标记有荧光报告基团，3’端标记有荧光淬灭基团，所述探针核苷酸序列的荧光报告基团为FAM、HEX、VIC、ROX、Cy5中的至少一种，荧光淬灭基团为BHQ1、BHQ2、MGB中的至少一种；所述反转录引物序列为权利要求1所述的反转录引物；扩增引物为权利要求1所述的正向引物和反向引物。

3.一种检测芯片或装置，其包括权利要求1所述的反转录引物、扩增引物和探针序列。

4.权利要求1所述的反转录引物、扩增引物和探针序列在制备川崎病的预测、辅助诊断川崎病的试剂或工具中的应用。

5.权利要求1所述的核酸序列组合在制备定性和/或定量检测miR-125a-5p、hsa-miR-3182、hsa-miR-3675-5p、miR-4433b-5p和miR-126试剂中的用途。