[发明专利]一种以石墨粉为净化材料的检测葡萄中赭曲霉毒素A的方法

权利要求书

1.一种以石墨粉为净化材料的检测葡萄中赭曲霉毒素A的方法，其特征在于：包括如下步骤：

步骤一：将赭曲霉毒素A含量分别为1-100μg/kg的空白样品，进行液相色谱检测；

步骤二：以空白样品中赭曲霉毒素A的浓度(x,μg/kg)为横坐标，对应色谱峰峰面积(y)为纵坐标，绘制基质标准工作曲线，进行回归计算，其线性方程为y＝0.1621x+0.3173，线性范围为1-100μg/kg，线性相关系数r为0.9994；

步骤三：取待测葡萄样品进行液相色谱检测，将待测葡萄样品检测后得到的赭曲霉毒素A的色谱峰面积代入回归方程，得到样品中赭曲霉毒素A的浓度；

所述的步骤一和步骤三中的液相色谱检测具体操作包括如下步骤：

步骤一：将葡萄样品破碎，称取10.0g破碎后的葡萄样品置于50mL离心管，加入10mL乙腈甲酸混合溶液，手动震荡1min，再依次加入1.0g氯化钠、4.0g无水硫酸镁，手动震荡1min，然后在8000r/min的离心速度下离心处理5min，取1mL上清液移入另一装有150mg无水硫酸镁和80mg石墨粉的2mL离心管中，手动震荡1min，然后再12000r/min的离心速度下离心处理5min，用带有过滤器的1mL注射器抽取上清液过滤，得待检测液；

步骤二：待检测液进行HPLC检测，HPLC检测条件为：色谱柱为：3.0mm×150mm，2.7μm的Poroshell120 EC-C₁₈色谱柱；流动相：流动相A：0.1％甲酸水溶液，流动相B：乙腈，采用梯度洗脱；柱温：30℃；进样量：10μL；检测器：FLD；激发波长Ex：334nm；发射波长Em：460nm。

2.根据权利要求2所述的一种以石墨粉为净化材料的检测葡萄中赭曲霉毒素A的方法，其特征在于：所述的步骤一中乙腈甲酸混合溶液中乙腈和甲酸的体积比为99：1。

3.根据权利要求1所述的一种以石墨粉为净化材料的检测葡萄中赭曲霉毒素A的方法，其特征在于：所述的步骤一种的过滤器中的滤膜为0.22μm滤膜。

4.根据权利要求1所述的一种以石墨粉为净化材料的检测葡萄中赭曲霉毒素A的方法，其特征在于：所述的步骤二梯度洗脱的操作为：0-5min：流动相A：50％，流动相B：50％，流量为0.5mL/min；5-10min：流动相A：30％，流动相B：70％，流量为0.5mL/min；10-15min：流动相A：10％，流动相B：90％，流量为0.5mL/min；15-18min：流动相A：50％，流动相B：50％，流量为0.5mL/min。

5.根据权利要求1所述的一种以石墨粉为净化材料的检测葡萄中赭曲霉毒素A的方法，其特征在于：所述的标准储备液：取赭曲霉毒素A标准品1.0mg置于10mL容量瓶中，用甲醇溶解并定容，配制成浓度为100mg·L^-1的赭曲霉毒素A标准溶液，4℃下避光保存。

6.根据权利要求1所述的一种以石墨粉为净化材料的检测葡萄中赭曲霉毒素A的方法，其特征在于：所述的空白样品的选取：选取健康的阳光玫瑰葡萄作为空白样品，经检测该样品中无待测样品，使用此空白样品进行加标回收试验和基质标准工作曲线的绘制。