[发明专利]一种以石墨粉为净化材料的检测葡萄中赭曲霉毒素A的方法

说明书

一种以石墨粉为净化材料的检测葡萄中赭曲霉毒素A的方法，包括如下步骤：步骤一：将赭曲霉毒素A含量分别为1‑100μg/kg的空白样品，进行液相色谱检测；步骤二：以空白样品中赭曲霉毒素A的浓度(x,μg/kg)为横坐标，对应色谱峰峰面积(y)为纵坐标，绘制基质标准工作曲线，进行回归计算，其线性方程为y＝0.1621x+0.3173，线性范围为1‑100μg/kg，线性相关系数r为0.9994；步骤三：取待测葡萄样品进行液相色谱检测，将待测葡萄样品检测后得到的赭曲霉毒素A的色谱峰面积代入回归方程，得到样品中赭曲霉毒素A的浓度。本发明得出能够准确检测出葡萄中赭曲霉毒素A方法，从而填补了现有领域的空白，为以后葡萄中赭曲霉毒素A的准确检测提供了方法。

技术领域

本发明属于葡萄中赭曲霉毒素A领域，具体地说是一种以石墨粉为净化材料的检测葡萄中赭曲霉毒素A的方法。

背景技术

赭曲霉毒素A(Ochratoxin A,OTA)是由多种曲霉属和青霉属真菌产生的一种次级代谢产物，主要污染粮谷类农作物，在多种粮食及制品中都检出过赭曲霉毒素A。人和动物进食被赭曲霉毒素A污染的食物后，会导致体内赭曲霉毒素A的蓄积，而且代谢缓慢。赭曲霉毒素A主要危及人和动物肾脏，具有高度致癌、致畸、致突变的作用，并被认为与人类的巴尔干肾病和泌尿系统肿瘤有关，国际癌症研究机构已将其定位2B类致癌物。联合国粮农组织和世界卫生组织建议赭曲霉毒素A的周摄入量不超过100ng/kg体重，我国目前还没有关于人群赭曲霉毒素A膳食摄入量的评价研究，但食品安全国家标准规定了谷物等粮食及制品中赭曲霉毒素A的限量标准为5ug/kg。现有赭曲霉毒素A的国标检测中有关于葡萄酒的相关标准，但是对于葡萄中的赭曲霉毒素A的检测方法缺少相关统一标准，目前我方培育出的葡萄品种在送样到山东省农业科学院农业质量标准与检测技术研究所进行检测分析时，对于葡萄中赭曲霉毒素A的检测方法采用的是检测辣椒中赭曲霉毒素A的国标检测方法，但是葡萄和辣椒中的成分存在巨大差异，葡萄采用辣椒检测的前处理方式以及检测方法能会出现误差，影响最终检测结果的准确性。

发明内容

本发明提供一种以石墨粉为净化材料的检测葡萄中赭曲霉毒素A的方法，用以解决现有技术中的缺陷。

本发明通过以下技术方案予以实现：

一种以石墨粉为净化材料的检测葡萄中赭曲霉毒素A的方法，包括如下步骤：

步骤一：将赭曲霉毒素A含量分别为1-100μg/kg的空白样品，进行液相色谱检测；

步骤二：以空白样品中赭曲霉毒素A的浓度(x,μg/kg)为横坐标，对应色谱峰峰面积(y)为纵坐标，绘制基质标准工作曲线，进行回归计算，其线性方程为y＝0.1621x+0.3173，线性范围为1-100μg/kg，线性相关系数r为0.9994；

步骤三：取待测葡萄样品进行液相色谱检测，将待测葡萄样品检测后得到的赭曲霉毒素A的色谱峰面积代入回归方程，得到样品中赭曲霉毒素A的浓度。

如上所述的一种以石墨粉为净化材料的检测葡萄中赭曲霉毒素A的方法，所述的步骤一和步骤三中的液相色谱检测具体操作包括如下步骤：

步骤一：将葡萄样品破碎，称取10.0g破碎后的葡萄样品置于50mL离心管，加入10mL乙腈甲酸混合溶液，手动震荡1min，再依次加入1.0g氯化钠、4.0g无水硫酸镁，手动震荡1min，然后在8000r/min的离心速度下离心处理5min，取1mL上清液移入另一装有150mg无水硫酸镁和80mg石墨粉的2mL离心管中，手动震荡1min，然后再12000r/min的离心速度下离心处理5min，用带有过滤器的1mL注射器抽取上清液过滤，得待检测液；