[发明专利]一种生物素标记莪术醇的合成方法

权利要求书

1.一种生物素标记莪术醇的合成方法，其特征在于，具体包括以下步骤：

(1)将化合物1溶于四氢呋喃中，冰浴条件下加入氢化钠，加热回流，冷却至室温，加入化合物2，再次加热回流，冷却至室温，浓缩，纯化，得到化合物3；

所述化合物1的结构式为

所述化合物2为溴乙酸甲酯，结构式为

所述化合物3的结构式为

(2)将化合物3溶于四氢呋喃和甲醇中，室温下加入氢氧化锂水溶液，搅拌反应，调节反应液pH，萃取有机相，干燥，过滤，浓缩，得到化合物4；

所述化合物4的结构式为

(3)将化合物4和叔丁氧羰基乙二胺溶于二氯甲烷中，加入4-二甲氨基吡啶和1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺盐酸盐，搅拌反应，淬灭反应，萃取有机相，水洗，酸洗，干燥，过滤，浓缩，得到化合物5；

所述化合物5的结构式为

(4)将化合物5溶于二氯甲烷中，加入盐酸二氧六环溶液，搅拌反应，浓缩，得到化合物6；

所述化合物6的结构式为

(5)将化合物6和生物素溶于N,N-二甲基甲酰胺中，加入4-二甲氨基吡啶和1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺盐酸盐，搅拌反应，纯化，得到化合物7，即为所述生物素标记莪术醇；

所述化合物7的结构式为

2.根据权利要求1所述的一种生物素标记莪术醇的合成方法，其特征在于，步骤(1)中，所述化合物1、四氢呋喃、氢化钠和化合物2的质量体积比为1g：50mL：508mg：1.3g。

3.根据权利要求1所述的一种生物素标记莪术醇的合成方法，其特征在于，步骤(1)中，所述加热回流的时间为2h；所述再次加热回流的时间为12h；所述纯化的方法为硅胶柱；所述纯化的溶剂为石油醚和乙酸乙酯；所述石油醚和乙酸乙酯的体积比为10:1。

4.根据权利要求1所述的一种生物素标记莪术醇的合成方法，其特征在于，步骤(2)中，所述化合物3、四氢呋喃、甲醇和氢氧化锂水溶液的质量体积比为500mg：10mL：10mL：2.5mL；所述氢氧化锂水溶液的浓度为2mol/L。

5.根据权利要求1所述的一种生物素标记莪术醇的合成方法，其特征在于，步骤(2)中，所述搅拌反应的时间为2h；所述调节反应液pH的试剂为稀盐酸，所述稀盐酸的浓度为1mol/L，调节反应液pH＝6；所述萃取有机相的试剂为乙酸乙酯；所述干燥的试剂为无水硫酸钠。

6.根据权利要求1所述的一种生物素标记莪术醇的合成方法，其特征在于，步骤(3)中，所述化合物4、叔丁氧羰基乙二胺、二氯甲烷、4-二甲氨基吡啶和1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺盐酸盐的质量体积比为475mg：284mg：30mL：20mg：465mg。

7.根据权利要求1所述的一种生物素标记莪术醇的合成方法，其特征在于，步骤(3)中，所述搅拌反应的时间为12h；所述淬灭反应的试剂为饱和食盐水；所述萃取有机相的试剂为乙酸乙酯；所述酸洗的试剂为稀盐酸，所述稀盐酸的浓度为0.5mol/L；所述干燥的试剂为无水硫酸钠。

8.根据权利要求1所述的一种生物素标记莪术醇的合成方法，其特征在于，步骤(4)中，所述化合物5、二氯甲烷和盐酸二氧六环溶液的质量体积比为350mg：10mL：10mL；所述盐酸二氧六环溶液的浓度为4mol/L；所述搅拌反应的时间为5h。

9.根据权利要求1所述的一种生物素标记莪术醇的合成方法，其特征在于，步骤(5)中，所述化合物6、生物素、N,N-二甲基甲酰胺、4-二甲氨基吡啶和1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺盐酸盐的质量体积比为270mg：200mg：10mL：10mg：230mg。

10.根据权利要求1所述的一种生物素标记莪术醇的合成方法，其特征在于，步骤(5)中，所述搅拌反应的时间为12h；所述纯化的方法为制备色谱HPLC，20％-95％，流速20mL/min，0.1％三氟乙酸体系，室温。