[发明专利]一种原料药中叔丁胺残留量的分析方法

权利要求书

1.一种化学原料药中叔丁胺胺残留量的分析方法，其特征在于，该分析方法包含以下步骤：

第一步：将供试品加适宜的溶剂A溶解；取上述溶液置容量瓶中，加入溶剂A、溶液B和衍生剂进行衍生化反应，置水浴中保温，取出放冷后，用溶剂A稀释至所需浓度；

第二步：取叔丁胺对照品，用溶剂A稀释至所需浓度后，照第一步“取上述溶液置容量瓶中，”开始，同法处理；

第三步：取上述两种溶液，分别精密量取适量，注入高效液相色谱仪中；

第四步：记录色谱图中叔丁胺衍生物的峰面积，按外标法计算供试品中叔丁胺的残留，所述计算公式为：

式中：

A_样-----供试品溶液的色谱图中叔丁胺衍生物的峰面积；

A_对-----对照品溶液的色谱图中叔丁胺衍生物的峰面积；

M_对-----对照品称样量(mg)；

M_样-----供试品称样量(mg)。

所述溶剂A选自甲醇、乙腈或二甲亚砜；所述溶液B选自氢氧化钠、氢氧化钾或碳酸氢钠；所述衍生剂选自邻苯二甲醛、水杨醛。

2.根据权利要求1所述的分析方法，其特征在于，所述化学原料药为含有酸根结构的化学原料药，优选为盐酸阿罗洛尔。

3.根据权利要求1所述的分析方法，其特征在于，所述溶剂A为甲醇；所述溶液B为氢氧化钠；所述溶液B摩尔浓度为0.05mol/L～1mol/L，优选为0.1mol/L。

4.根据权利要求1所述的分析方法，其特征在于，所述衍生剂为水杨醛；所述衍生化反应时间为20～40min，优选为30min。

5.根据权利要求1所述的分析方法，其特征在于，第一步中供试品溶液浓度为0.5mg/ml～5mg/ml，优选为2mg/ml。

6.根据权利要求1所述的分析方法，其特征在于，第二步中对照品溶液浓度为0.5μg/ml～5μg/ml，优选为2μg/ml。

7.根据权利要求1所述的分析方法，其特征在于，第三步中，所述高效液相条件的检测波长为274nm或348nm，优选为348nm。

8.根据权利要求1所述的分析方法，其特征在于，第三步中，所述高效液相条件的检测方法流动相A的pH值为2.0～5.0，优选pH值为3.0。

9.一种盐酸阿罗洛尔原料药中叔丁胺残留量的分析方法，其特征在于，该分析方法包括以下步骤：

第一步：盐酸阿罗洛尔样品用甲醇溶解后置容量瓶中，加入甲醇、氢氧化钠和10％水杨醛-甲醇进行衍生化反应，置水浴中保温，取出放冷后，用甲醇稀释至所需浓度；

第二步：取叔丁胺对照品，用甲醇稀释至所需浓度后，照第一步“取上述溶液置容量瓶中，”开始，同法处理；

第三步：取上述两种溶液，分别精密量取适量，注入高效液相色谱仪中，色谱条件为：以0.02mol/L磷酸二氢钾溶液为流动相A，用磷酸调节pH值至3.0±0.1，乙腈为流动相B，进行线性梯度洗脱，检测波长为348nm。

第四步：记录色谱图中叔丁胺胺衍生物的峰面积，按外标法计算供试品中叔丁胺衍生物的残留。

10.根据权利要求9所述的分析方法，其特征在于，该分析方法包括以下步骤：

第一步：取盐酸阿罗洛尔样品50mg至25ml容量瓶，加甲醇10mL溶解，加0.1mol/L氢氧化钠0.5ml和10％水杨醛-甲醇1ml，在60℃水浴中衍生30min，取出放冷，加甲醇稀释至刻度；

第二步：取叔丁胺对照品适量，加甲醇稀释制成50μg/ml溶液；取上述溶液1ml置25ml容量瓶，加甲醇10mL、0.1mol/L氢氧化钠0.5ml和10％水杨醛-甲醇1ml，在60℃水浴中衍生30min，取出放冷，加甲醇稀释至刻度；

第三步：取上述两种溶液，分别精密量取20μl，注入液相色谱仪中，以十八烷基键合硅胶(WELCH Ultimate AQ-C18，5μm，4.6×250mm)为填料，柱温为30℃，检测波长为348nm，0.02mol/L KH₂PO₄为流动相A，用磷酸调节pH值至3.0±0.1，乙腈为流动相B，按下表梯度洗脱，流速为1.0ml/min。

T(min)	A％	B％
0	75	25
20	75	25
21	20	80
30	20	80
31	75	25
40	75	25

第四步：记录色谱图中叔丁胺衍生物的峰面积，按外标法计算供试品中叔丁胺的残留。