[发明专利]大果木姜子中倍半萜类化合物及其制法与应用

说明书

本发明的大果木姜子中倍半萜类化合物及其制法与应用，属于医药科技领域，涉及从樟科木姜子属植物大果木姜子果实中提取分离的九个新倍半萜化合物Litsemene A‑E(1‑5)和Litsemnolide A‑D(6‑9)，结构如下式所示，所述化合物采用聚酰胺、硅胶、HP20柱层析、ODS柱层析、HPLC等色谱方法得到。制备方法简单，重现性好，纯度高。获得的化合物具有良好的抗PD活性作用，应用于具有抗帕金森病(PD)药物的制备。

技术领域：

本发明属于医药技术领域，具体涉及大果木姜子中倍半萜类化合物及其制法与应用。

背景技术：

帕金森病：(Parkinson’s disease，PD)一种常见的神经系统变性疾病，其最主要的病理性改变是中脑黑质多巴胺能神经元的变性死亡，由此引起纹状体多巴胺能神经元含量显著性减少而致病。PD常见于中老年人，导致这一病理改变的确切病因目前仍不清楚，遗传因素、环境因素、年龄老化、氧化应激等均可能参与多巴胺能神经元的变性死亡过程，但已有足够的证据表明氧化应激引起的细胞凋亡增多与多巴胺能神经细胞退行性病变是密切相关的。

过氧化氢(H₂O₂)诱导的SH-SY5Y细胞帕金森病模型：H₂O₂对多巴胺神经细胞有损害，在黑质铁离子催化下产生有毒的羟基，受损细胞会使多巴胺能神经元置于氧化应激状态，二十多年来广泛诱导实验性PD实验模型的有效药物，极大的促进了PD的研究进展。

但现有技术中尚未有对大果木姜子进行具有良好神经保护活性的有效成分提取制备的相关技术。

发明内容：

本发明的目的是克服上述现有技术存在的不足，提供一种大果木姜子中倍半萜类化合物及其制法与应用，通过从大果木姜子果实中提取分离得到9个新的倍半萜类化合物，并将其应用在抗PD药物的制备。

为实现上述目的，本发明采用以下技术方案：

大果木姜子中倍半萜类化合物，具体包括9个化合物，结构式如下所示：

所述的倍半萜类化合物在制备具有抗帕金森病(PD)药物中的应用。

所述的倍半萜类化合物的制备方法，包括如下步骤：

(1)取干燥的大果木姜子果实，以80％工业乙醇回流提取4次，合并提取液浓缩得到浸膏；浸膏先后采用石油醚，乙酸乙酯，正丁醇萃取；乙酸乙酯部分和正丁醇部分经聚酰胺色谱，以乙醇水系统进行梯度洗脱，共收集到3个馏分(Fr I～Fr III)；

(2)馏分Fr.I经硅胶柱色谱分离，以二氯甲烷-甲醇梯度洗脱，收集得到3个馏分(Fr.A～Fr. C)；

(3)馏分Fr.A,Fr.B,Fr.C经HP20柱分离，以乙醇水梯度洗脱，收集得到4个馏分(Fr.1,Fr. 2,Fr.3,Fr.4)；

(4)馏分Fr.1,Fr.2,Fr.3,Fr.4经ODS柱分离，以乙醇水梯度洗脱，收集得到6个馏分(Fr. a,Fr.b,Fr.c,Fr.d,Fr.e,Fr.f)；

(5)馏分Fr.a,Fr.b,Fr.c,Fr.d经硅胶柱分离，经石油醚/乙酸乙酯梯度洗脱，其中洗脱得到的馏分经制备型HPLC，以CH₃OH-H₂O洗脱，再经过半制备型HPLC色谱，以CH₃CN-H₂O洗脱，分离纯化得到化合物1，化合物2，化合物3，化合物4，化合物5，化合物6，化合物 7，化合物8，化合物9。

所述的步骤(1)中，乙醇水的梯度浓度为：20％-90％。

所述的步骤(2)中，二氯甲烷-甲醇的梯度为：(100-1)：1。