[发明专利]一种外生菌根真菌与兴安落叶松修复重金属污染土壤的方法

说明书

本发明涉及土壤污染防治领域，公开了一种外生菌根真菌与兴安落叶松修复重金属污染土壤的方法，所述方法包括如下步骤：(1)制备外生菌根真菌菌剂；(2)培育兴安落叶松幼苗；(3)菌剂施用，改良土壤。本发明有效解决了重金属污染的土壤修复速度慢、修复效果不佳的问题。

技术领域

本发明属于土壤污染防治领域，更具体地涉及一种外生菌根真菌与兴安落叶松修复重金属污染土壤的方法。

背景技术

重金属无法降解且广泛存在于各类型土壤中，严重威胁到生态系统的稳定和人类的安全。其中镉毒性大、污染程度高、无法降解和逆转、具可移动性,成为重金属污染的代表，因此对土壤镉污染的修复已成为解决环境问题的重点。

目前修复污染土壤的手段中，物理和化学手段的成本高且会二次污染土壤，而生物修复手段经济环保，能利用植物和微生物积累大量重金属，有较大的修复优势。外生菌根真菌能和植物根系形成共生体—菌根，外生菌根通过增加植株根系表面积来增强水和养分吸收，从而促进植物生长、提高抗逆性。同时菌根能改变土壤的理化性质，降低土壤重金属的生物活性，提高植物对重金属的抗性和修复能力。目前有80％以上的高等植物能和真菌形成菌根，并广泛发现于松科、柏科、杨柳科等植物。兴安落叶松(Larix gmelinii) 为松科落叶松属的落叶乔木，是东北常见的造林树种，有观赏性强、生长速度快、抗逆性强等优点，具有很高的生态修复价值，是东北地区主要三大针叶用材林树种之一。

现有技术中对被重金属污染的土壤修复的速度慢、修复效果不佳。利用真菌与一些草本植物的共生体促进植物吸附重金属，但是这些植物生物量小，修复速度慢，因此研究生物量大的速生植物的菌根重金属修复能力意义重大。

发明内容

为解决现有技术中对重金属污染的土壤修复速度慢、修复效果不佳的问题，本发明提供一种外生菌根真菌与兴安落叶松修复重金属污染土壤的方法。

本发明采用的具体方案为：一种外生菌根真菌与兴安落叶松修复重金属污染土壤的方法，所述方法包括如下步骤：

(1)制备外生菌根真菌菌剂；

(2)培育兴安落叶松幼苗；

(3)菌剂施用，改良土壤。

所述步骤(1)中制备外生菌根真菌菌剂的方法为：外生菌根真菌选用美味牛肝菌和血红铆钉菇，采用固体培养基进行平板培养，24-26℃培养7-8d，菌丝长满后用打孔器取边缘菌块的直径为7-8mm，置于液体培养基培养，放入摇床内避光培养18-20d，得到外生菌根真菌菌剂。

所述摇床的温度23-25℃，转速100-120r/min。

所述液体培养基的配方为马铃薯200g/L，葡萄糖20g/L，KH₂PO₄3g/L，MgSO₄·7H₂O1.5g/L，VitaminB1 0.02g/L。

所述固体培养基的配方为马铃薯200g/L，葡萄糖20g/L，琼脂15g/L，去离子水1L。

所述步骤(3)中菌剂施用的具体操作为：选取长势相近的幼苗，用蒸馏水将根部清洗，将外生菌根真菌Be和Gr的菌液浸染根部48-50h后移栽到容器中，每个容器内放置一株幼苗，萌发30-32d后，幼苗长出侧根后，选生长一致的苗，放于装满蒸馏水的容器内让根部土壤自由散落，用蒸馏水清洗；将液体培养后的真菌溶液磨碎后制成菌液，将筛选出的幼苗放于菌液内进行浸染，浸泡42h后取出，移栽到容器里，每个容器内放置一株幼苗；栽植后置于温度23-25℃、16-18h光照培养室内进行培养。

所述步骤(3)中将菌根化兴安落叶松幼苗移栽入装有重金属土壤中，对重金属污染的土壤进行改良。