[发明专利]一种中华鳖和中华草龟胚胎成纤维细胞永生化方法在审
| 申请号： | 202210173319.9 | 申请日： | 2022-02-24 |
| 公开（公告）号： | CN114657142A | 公开（公告）日： | 2022-06-24 |
| 发明（设计）人： | 孙云霄;曹代男;魏玉峰;高养春;秦瑶 | 申请（专利权）人： | 广东省科学院动物研究所 |
| 主分类号： | C12N5/10 | 分类号： | C12N5/10;C12N15/867;C12N15/34;C12N5/073 |
| 代理公司： | 广州科粤专利商标代理有限公司 44001 | 代理人： | 刘明星;朱聪聪 |
| 地址： | 510000 *** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 中华 胚胎 纤维 细胞 永生 方法 | ||
【权利要求书】：
1.一种中华鳖和中华草龟胚胎成纤维细胞永生化方法，其特征在于，包括以下步骤：
将包含SV40大T抗原的重组慢病毒感染中华鳖或中华草龟的原代胚胎成纤维细胞后，用嘌呤霉素筛选获得中华鳖或中华草龟永生化胚胎成纤维细胞。
2.根据权利要求1所述的中华鳖和中华草龟胚胎成纤维细胞永生化方法，其特征在于，所述的包含SV40大T抗原的重组慢病毒是将SV40大T抗原转染进入慢病毒得到的。
3.根据权利要求1所述的中华鳖和中华草龟胚胎成纤维细胞永生化方法，其特征在于，所述的原代胚胎成纤维细胞是第3代原代胚胎成纤维细胞。
4.根据权利要求1所述的中华鳖和中华草龟胚胎成纤维细胞永生化方法，其特征在于，所述的用嘌呤霉素筛选是用2μg/mL嘌呤霉素筛选。
5.根据权利要求4所述的中华鳖和中华草龟胚胎成纤维细胞永生化方法，其特征在于，所述的用嘌呤霉素筛选是重组慢病毒感染中华鳖或中华草龟的原代胚胎成纤维细胞后加入含有2μg/mL嘌呤霉素的培养基,对细胞进行筛选,获得中华鳖或中华草龟永生化胚胎成纤维细胞。
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