[发明专利]一种Ⅱ型胶原蛋白肽多糖去除的方法

权利要求书

1.一种Ⅱ型胶原蛋白肽多糖去除的方法，其特征在于，包括步骤：

（1）原料预处理：选取提取完硫酸软骨素的动物软骨，粉碎，然后进行脱脂、脱杂蛋白、脱钙处理；

（2）制备酶解液：将步骤（1）向预处理得到的动物软骨中加入蛋白酶酶解2-6h后经灭酶、离心，得到酶解液；

（3）多糖降解：向步骤（2）得到的酶解液中加入辅助降解剂并进行超声波处理，得到降解液；

（4）超滤脱糖：选取5-10kDa分子量的超滤膜对步骤（3）得到的降解液进行过滤，收集滤出液，得到Ⅱ型胶原蛋白肽溶液。

2.根据权利可要求1所述的一种Ⅱ型胶原蛋白肽多糖去除的方法，其特征在于，步骤（3）中所述辅助降解剂与所述酶解液的体积比为1-2.5:25；所述辅助降解剂为过氧化氢、乙醇中的一种或两者的复配物。

3.根据权利可要求2所述的一种Ⅱ型胶原蛋白肽多糖去除的方法，其特征在于，步骤（3）中超声波处理条件为：超声波频率20-80kHz、温度30-60℃、时间0.5-3h。

4.根据权利可要求1所述的一种Ⅱ型胶原蛋白肽多糖去除的方法，其特征在于，步骤（4）中所述滤出液的流速为2-4ml/min。

5.根据权利可要求1所述的一种Ⅱ型胶原蛋白肽多糖去除的方法，其特征在于，步骤（2）中所述蛋白酶与动物软骨的质量比为0.01-0.1：1。

6.根据权利可要求5所述的一种Ⅱ型胶原蛋白肽多糖去除的方法，其特征在于，步骤（2）中所述蛋白酶包括碱性蛋白酶、中性蛋白酶、胃蛋白酶。

7.根据权利可要求1所述的一种Ⅱ型胶原蛋白肽多糖去除的方法，其特征在于，步骤（1）中脱脂处理包括：采用乙醚溶液浸泡12-24h，然后加热直至乙醚完全挥发。

8.根据权利可要求1所述的一种Ⅱ型胶原蛋白肽多糖去除的方法，其特征在于，步骤（1）中脱杂蛋白处理包括：在0-10℃下加入NaOH溶液浸泡并磁力搅拌3-12h，并且每2-3h更换一次NaOH溶液。

9.根据权利可要求1所述的一种Ⅱ型胶原蛋白肽多糖去除的方法，其特征在于，步骤（1）中脱钙处理采用EDTA脱钙溶液，所述EDTA脱钙溶液与动物软骨的体积比为4-10:1。