[发明专利]一种白首乌不定芽诱导培养基及诱导方法

说明书

本发明属于组织培养技术领域，具体涉及一种白首乌不定芽诱导培养基及诱导方法。所述诱导培养基以MS培养基为基本培养基，每升MS培养基添加有1‑2mg的5‑ALA，0‑1mg的6‑BA，1mg的NAA。诱导白首乌形成不定芽的方法，是将白首乌愈伤组织置于所述的诱导培养基中进行诱导培养以分化形成不定芽。本发明的诱导培养基成功大规模的诱导出了不定芽，且萌发率高、分化率高、平均芽数量高，为培育壮苗工作奠定基础，为生产实践提供科学依据。

技术领域

本发明属于组织培养技术领域，具体涉及一种白首乌不定芽诱导培养基及诱导方法。

背景技术

白首乌(Cynanchum bungei Decne)又名，白人参。古籍记载，白首乌用于晚唐，盛行于早明，沿用至今。因其补肾益肝、乌发生发、养血益精、抗衰老之功效，被历代名家视为摄生防老珍品。中国白首乌的95％出产在江苏省盐城市滨海县，滨海是中国唯一首乌之乡。白首乌多为药材，滨海白首乌为保健草药，以保健为主，因其温补宜人，且具有无毒副作用，因此可用于日常服用。滨海当地的人们多为早茶或下午茶食之。

“滨乌1号”，原名“白何首乌6-16”，由江苏省白首乌产业协会以何首乌地方品种经系统选育，于2007年育成。“滨乌1号”为蔓生半灌木，发棵快、长势强、生长整齐。茎蔓圆形，中空，茎色青绿，呈左旋相互绕的习性。叶蔓层高76.4厘米，比对照高10厘米；叶对生，宽卵形；聚伞花序，花白色；荚果双生，种子扁卵状、褐色，种子顶端有一簇白色绒毛。块根纺锤形、粗短，块根皮色土黄，块根肉色类白。播种至出苗天数：春播比对照早5-6天，夏播比对照早3天左右。田间褐斑病发生较轻。一般产量达每公顷15～18吨，高产可达22吨以上。栽植密度每公顷(90000±7500)株，单个块根鲜重250～300克。

由于野生白首乌和目前种植的白首乌供不应求，严重影响了白首乌这一中药材的开发利用和产业化进程，故进行人工栽培。目前白首乌常规的栽培方式有种子播种和藤蔓扦插，但仍然不能满足需要，因此，建立一套完整的白首乌组织培养体系十分重要。

现有的白首乌愈伤组织诱导不定芽的方式都有诱导出芽率低，生长势差，易污染，丛生芽增殖系数低等缺点，这些都严重影响着白首乌组织培养的发展，并制约了白首乌组织培养工厂化生产技术的推广和应用。

发明内容

为解决现有技术的不足，本发明提供了一种白首乌不定芽诱导培养基及诱导方法。

本发明采用如下技术方案：

第一方面，本发明提供一种白首乌不定芽诱导培养基，所述诱导培养基以MS培养基为基本培养基，每升MS培养基添加有1-2mg的5-ALA，0-1mg的6-BA，1mg的NAA。

进一步的，该诱导培养基的pH为5.7-5.9。

第二方面，本发明提供一种诱导白首乌形成不定芽的方法，是将白首乌愈伤组织置于所述的诱导培养基中进行诱导培养以分化形成不定芽。

进一步的，所述诱导培养的条件为：温度为24-26℃，光照强度为1000lx，光照时间为12h/d，培养30-32天。

进一步的，所述白首乌愈伤组织是由以下步骤制备而成：

S1、选取白首乌的去芽鞘茎段部分作为外植体；

S2、对所述外植体进行消毒，并将其切成1-1.2cm长度，然后接种于愈伤组织诱导培养基，暗培养18-20天。

更进一步的，S1中，所述消毒是将外植体流水冲洗3-4h，用75％的酒精消毒30-40s，再用0.1％的升汞消毒8-10min，用无菌水冲5-6次。

更进一步的，S2中，所述愈伤组织诱导培养基以MS培养基为基本培养基，每升MS培养基添加有1.0mg的2,4-D，2.0mg的6-BA，0.8％-0.9％琼脂，30g的蔗糖，pH为5.8-5.9。