[发明专利]一种提高混合青贮饲料发酵品质的生物制剂及其制备方法

权利要求书

1.一种提高混合青贮饲料发酵品质的生物制剂的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

（1）将布氏乳杆菌和植物乳杆菌分别进行培养得到布氏乳杆菌种子液和植物乳杆菌种子液；

所述布氏乳杆菌的保藏号为CICC 20293，所述植物乳杆菌的保藏号为CICC 20765；

（2）将布氏乳杆菌种子液和植物乳杆菌种子液分别接种到含有桑叶提取物和菊芋提取物的发酵培养基中进行培养，过滤得到布氏乳杆菌发酵液和植物乳杆菌发酵液，混合后得到青贮饲料桑和苜蓿的生物制剂；

所述菊芋提取物由以下方法制备：

a.将菊芋块茎粉碎、烘干，得到菊芋颗粒；

b.将菊芋颗粒用乙醇回流提取，过滤后浓缩干燥得到菊芋提取物；

所述桑叶提取物由以下方法制备：

a.将桑叶粉碎后与水混合蒸煮得到桑叶液，桑叶液冷却后加入纤维素酶和果胶酶进行酶解，过滤得到酶解液；

b.将酶解液浓缩得到浸膏，将浸膏过聚酰胺柱层析，以体积比为4：1的乙醇-乙酸乙酯为洗脱剂进行洗脱，收集洗脱液浓缩、喷雾干燥后得到桑叶提取物。

2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤（2）中，所述布氏乳杆菌种子液和植物乳杆菌种子液的菌浓度均为1.0×10⁹CFU/mL；所述布氏乳杆菌种子液和植物乳杆菌种子液的接种量为发酵培养基体积的3%~7%。

3.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，桑叶提取物制备方法的步骤a中，所述桑叶与水的质量比为1：（5~10）；所述纤维素酶和果胶酶的质量比为1：1，所述纤维素酶的加入量占桑叶液总质量的3%~5%；所述酶解的温度为45~55℃，酶解时间为12~24h。

4.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，菊芋提取物制备方法的步骤b中，所述乙醇的体积浓度为70%~80%，回流温度为65~75℃，回流时间为0.3~1h；所述菊芋颗粒与乙醇的质量比为1:（10~15）。

5.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤（2）中，所述发酵培养基为MRS培养基；每升MRS培养基中添加60~10g桑叶提取物；每升MRS培养基中添加100~200g菊芋提取物。

6.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤（2）中，所述布氏乳杆菌发酵液和植物乳杆菌发酵液的质量比为（1~3）：1；所述发酵的温度为35~37℃，发酵时间为1~2d。

7.权利要求1~6任一项所述的制备方法制得的提高混合青贮饲料发酵品质的生物制剂。

8.权利要求7所述的提高混合青贮饲料发酵品质的生物制剂在制备木本植物和草本植物混合青贮饲料中的应用，所述木本植物为饲料桑，所述草本植物为苜蓿。