[发明专利]一种高效分离带有野生稻血缘的抗白叶枯病基因及其家族成员的方法

说明书

本发明提供了一种高效分离带有野生稻血缘的抗白叶枯病基因及其家族成员的方法，属于分子生物学技术领域。本发明提供了一种高效分离带有野生稻血缘的抗白叶枯病基因及其家族成员的方法，利用来自元江普通野生稻与栽培稻杂交获得的多样化抗谱后代材料，高效快速地克隆到Xa47(t)基因及其家族成员，不仅为分离新的基因提供了较好的借鉴方法，同时避免了常规图位克隆的繁琐和耗时费力，利用元江普通野生稻杂交后代(渗入系)获得的家族成员，其遗传背景清晰，为后续研究家族成员的功能以及育种利用奠定了坚实的基础。

技术领域

本发明涉及分子生物学技术领域，具体涉及一种高效分离带有野生稻血缘的抗白叶枯病基因及其家族成员的方法。

背景技术

水稻(Oryza sativa L.)是全世界近一半人口的主粮，然而水稻生长发育过程中时常遭遇各种病原物的危害，严重制约着水稻的高产稳产以及稻米品质。由稻黄单胞杆菌(Xanthomonas oryzae pv.oryzae，简称Xoo)引起的水稻白叶枯病(bacterialblight)是世界范围内最严重的细菌性病害，也是我国水稻三大病害之一，我国除新疆、西藏和东北的北部以外均有不同程度的发生，长江以南和江淮平原籼稻产区为常发区，遭受白叶枯病危害后易造成水稻减产20％～30％，严重时可达50％，甚至绝收。随着全球气候逐渐变暖，水稻白叶枯病发生面积在逐年增加，水稻产量损失严重，已严重威胁到国家粮食安全(陈功友,徐正银,杨阳阳,等.我国水稻白叶枯病菌致病型划分和水稻抗病育种中应注意的问题.上海交通大学学报(农业科学版),2019,37(1):71-77.)。从长远途径来说，要想在水稻白叶枯病害常发区获得理想的水稻产量，就必须不断培育抗病新品种，以抵御白叶枯病菌的不断变异。尤其是多渠道、多来源发掘出抗白叶枯病基因，并服务于育种实践，已成为目前水稻分子育种的重要目标。

回顾水稻新品种的培育历程，育种家们大都将来自栽培品种中的优良基因不断重组、聚合，导致栽培品种原有的遗传资源利用日趋饱和，许多改良品种具有相同或相似的遗传来源，造成了遗传上的单一性，尤其由于早期育种家们对栽培稻抗病特性的忽视，我们现有的栽培稻不具有抗病特性或携有的抗病基因单一。从远缘种群中引入优良基因创作新的水稻品种是扩大亲本间遗传差异的重要途径之一。栽培稻有20多个野生近缘种，包含有极其丰富的遗传变异。云南省是亚洲栽培稻的遗传多样性中心和起源中心之一，拥有中国的全部三种野生稻，即普通野生稻(Oryza rufipogon Griff.)、药用野生稻(Oryzaofficinalis Wall.)和疣粒野生稻(Oryza granulataBaill.)，而且每种野生稻具有许多亚种或生态类型，这些种质资源在表型和分子水平上都具有较高的遗传多样性，拥有显著的抗逆、抗病虫害、耐寒、耐旱和耐贫瘠等许多优良性状(陈玲,张敦宇,陈越,等.云南药用野生稻种质资源的白叶枯病抗性评价.南方农业学报,2019,50(7):1417-1425；程在全.云南野生稻遗传特性及其优良基因克隆研究.四川:四川大学,2006.)。因此，利用拥有的广谱高抗白叶枯病的野生资源培育水稻新品种，这不仅将大大降低生产成本，而且具有重要的生态意义。