[发明专利]一种鸡蛋白-金纳米簇的制备方法及其在槲皮素检测中的应用

说明书

本发明涉及金铂纳米簇合成技术领域，尤其涉及一种鸡蛋白‑金纳米簇的制备方法及其在槲皮素检测中的应用，具体步骤如下：以鸡蛋白为模板，在特定的pH条件下制备鸡蛋白‑金纳米簇原液。在365nm激发波长下，金纳米簇呈现红色荧光，最大发射峰位于665nm处；金纳米簇作为一种有效的环境友好型荧光探针可用于检测溶液中的槲皮素(Que)。本发明的荧光金纳米簇具有独特的光物理特性、制备简单、毒性低、稳定性高，检测槲皮素方法快速简单、检测灵敏度高，是应用于生物和医学领域的理想荧光纳米材料。

技术领域

本发明涉及金铂纳米簇合成技术领域，尤其涉及一种鸡蛋白-金纳米簇的制备方法及其在槲皮素检测中的应用。

背景技术

鸡蛋白是一种含有约11％的蛋白质和糖蛋白的高粘度溶液，其含有四十多种蛋白质，如卵清蛋白(54％)，卵运铁蛋白(12％)、卵黏蛋白(1.5％)、卵类黏蛋白(10％)等，具有润肺利咽、清热解毒、增强免疫力等功能。卵清蛋白含有足够的氨基酸残基，如酪氨酸和半胱氨酸，而半胱氨酸和组氨酸残基可作为金属离子的保护剂；酪氨酸残基可作为还原剂，在碱性条件下还原贵金属离子。加之鸡蛋白价廉、易得、实用以及环境友好等特性，是合成金属纳米簇的理想材料之一。

金属纳米团簇是由几个到几百个原子组成的具有荧光的超小纳米颗粒，具有独特的物理、电化学、催化和光学特性。蛋白质由于包含多个活性位点如硫醇、氨基、羧基和羟基，能聚集和还原金属离子，常作为稳定剂和还原剂作用于金属中心，而且蛋白质具有低毒性、生物相容性好和化学稳定性高等特点，是一种常用的合成模板。制备得到的金属纳米簇具有易合成，超小尺寸，荧光强，斯托克斯位移较大，毒性低，稳定性好等优点，由于其类分子的特性，在识别和定量微体积样品中具有特殊潜力。

槲皮素是一种广泛分布于多种果蔬中的黄酮醇类化合物，具有多种生物活性，如抗氧化、抗组胺、抗炎等；但研究发现大剂量摄入也会引起副作用，包括常见的胃反酸，以及增加身体炎症引起关节疼痛和僵硬，体内激素(尤其是雌激素)水平异常变化。然而，针对槲皮素的传统检测方法具有检测成本高、灵敏度低、耗时长等局限性，因而亟待开发一种快捷高效的方法精确检测生物样本中的槲皮素。

发明内容

本发明的目的是为了解决现有技术中存在的缺点，而提出的一种鸡蛋白-金纳米簇的制备方法及其在槲皮素检测中的应用，以鸡蛋白为模板，采用一步合成法在水溶液中制备鸡蛋白-金纳米簇，具有独特的光物理特性、低毒性和优异的生物相容性，检测槲皮素方法快速简单、检测灵敏度好。

为了实现上述目的，本发明采用了如下技术方案：

一种鸡蛋白-金纳米簇的制备方法，具体步骤如下：

S1、称量一定量的鸡蛋白，加入100μL水溶解，加入100μL氯金酸漩涡震荡搅拌2分钟，得到溶液A；

S2、将1M氢氧化钠溶液加入到溶液A中混合均匀调节溶液pH为9～13，20℃-55℃水浴加热1-10小时，得到溶液B；

S3、将步骤2得到的溶液B，保存在4℃条件下，得到鸡蛋白-金纳米簇。

优选地，所述S1中，鸡蛋白浓度为60mg ml^-1。

优选地，所述S2中，溶液pH为13，加热温度为55℃，加热时间为8小时。

本发明还提供了一种鸡蛋白-金纳米簇的制备方法得到的鸡蛋白-金纳米簇在槲皮素检测中的应用，用蒸馏水稀释鸡蛋白-金纳米簇，加入不同浓度的槲皮素混合均匀，并在室温条件下孵育，激发波长条件下，随着槲皮素浓度的逐渐增加，鸡蛋白-金纳米簇的荧光强度逐渐减弱，实现定量检测。

优选地，在室温条件下孵育10分钟，在365nm激发波长条件下，实现检测。

与现有技术相比，本发明具有以下有益效果：