[发明专利]一种刺梨无刺1号无刺品系的特异分子标记及其应用

说明书

本发明提供了一种刺梨无刺1号无刺品系的特异分子标记及其应用，属于农作物分子育种技术领域。本发明通过一次双重PCR同时检测双标记位点，利用2个InDe1标记即可简单、快速地鉴定出刺梨材料中的无刺1号无刺品系，而且双标记位点同时检测，相互印证，相互检验，也能确保检测结果的准确性、有效性及可靠性，因此在刺梨品种的区分和种间杂交种的鉴定等方面具有重大应用价值，也能为创新大果无刺鲜食刺梨品种提供技术支撑。此外，利用本发明在育种材料的幼苗期提取其叶片基因组DNA进行双重PCR扩增，通过观察电泳条带即可鉴定其是否为无刺1号无刺品系，因而也可缩短无刺刺梨的育种周期，加快育种进程。

技术领域

本发明属于农作物分子育种技术领域，尤其涉及一种刺梨无刺1号无刺品系的特异分子标记及其应用。

背景技术

刺梨(Rosa roxburghii Tratt.)属蔷薇科蔷薇属植物，是我国特有的、并正在大力开发的新兴果树，在贵州、四川、河南、广西等省区均有商业化种植和产品加工。其中贵州省栽培面积已达230余万亩，成为全省重点发展的特色产业。刺梨具有极高的营养、保健和医药价值，但由于刺梨果实密被皮刺导致鲜食消费人群限制，刺梨鲜果绝大部分(90％以上)用于加工，用于鲜食的不足10％；同时刺梨果刺也给栽培管理、鲜果采收、运输、加工等带来诸多不便。为此，无刺刺梨(R.roxburghii Tratt.f.esetesa Ku)种质资源的搜集与研究成为提升刺梨鲜食品质的关键。

由于长时间的实生繁殖、自然变异和种间杂交，刺梨性状参差不齐、品种鱼龙混杂，出现多种变异类型；同时无刺刺梨变型与普通刺梨在外观形态上仅有一个性状的差异，即果实无刺，在枝叶形态特征上并无差异，所以利用形态学的方法难以将其区分。而且目前在刺梨特异分子标记的研究中也未涉及利用inDel标记鉴定无刺性状的方法。

发明内容

为了解决上述技术问题，本发明提供了一种刺梨无刺1号无刺品系的特异分子标记及其应用。本发明通过一次双重PCR同时检测双标记位点，利用2个InDe1标记即可简单、快速、准确、有效地鉴定出刺梨材料中的无刺1号无刺品系，在刺梨品种的区分和种间杂交种的鉴定等方面具有重大应用价值，同时也能为创新大果无刺鲜食刺梨品种提供技术支撑，而且也可缩短无刺刺梨的育种周期，加快育种进程。

为了实现上述目的，本发明采用了以下技术方案：

本发明提供了一种分子标记，由分子标记153.61和分子标记341.112组成；所述分子标记153.61的上游引物序列如SEQ ID No.1所示，下游引物序列如SEQ ID No.2所示；所述分子标记341.112的上游引物序列如SEQ ID No.3所示，下游引物序列如SEQ ID No.4所示。

本发明还提供了一种特异性引物组合，含有核苷酸序列如SEQ ID No.1～SEQ IDNo.4所示的引物。

本发明也提供了一种含有所述引物组合的试剂盒。

本发明还提供了一种所述分子标记或所述引物组合或所述试剂盒在无刺刺梨育种中的应用。

本发明还提供了一种分子标记的方法，将分子标记153.61和分子标记341.112的引物混合后扩增刺梨育种材料，如果能够同时扩增出500bp和100bp的扩增片段，则标志着所标记的育种材料为刺梨无刺1号无刺品系；所述分子标记153.61的上游引物序列如SEQID No.1所示，下游引物序列如SEQ ID No.2所示；所述分子标记341.112的上游引物序列如SEQ ID No.3所示，下游引物序列如SEQ ID No.4所示。

本发明还提供了一种检测刺梨无刺1号无刺品系的方法，用具体序列如SEQ IDNo.1～SEQ ID No.4所示的引物对提取的刺梨基因组DNA进行PCR扩增；然后观察扩增结果，得出结论。