[发明专利]一种磁珠法病毒核酸提取试剂盒以及使用方法在审

专利信息
申请号: 202210215819.4 申请日: 2022-03-07
公开(公告)号: CN114438076A 公开(公告)日: 2022-05-06
发明(设计)人: 傅明华;李美琼;夏姝瑞;聂晶 申请(专利权)人: 江苏迅睿生物技术有限公司
主分类号: C12N15/10 分类号: C12N15/10
代理公司: 北京棘龙知识产权代理有限公司 11740 代理人: 张开
地址: 221000 江苏省徐州市经济技*** 国省代码: 江苏;32
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摘要:
搜索关键词: 一种 磁珠法 病毒 核酸 提取 试剂盒 以及 使用方法
【权利要求书】:

1.一种磁珠法病毒核酸提取试剂盒,其特征在于,包括裂解液、磁珠液、洗涤液Ⅰ、洗涤液Ⅱ、洗涤液Ⅲ及洗脱液,所述所述裂解液由以下物质组成:Tris-HCl,硫氰酸胍,EDTA,Triton-100,PEG-6000,SDS,异丙醇,水;

所述洗涤液Ⅰ包括以下原料:Tris-HCl、盐酸胍;

所述洗涤液Ⅱ、洗涤液Ⅲ包括以下原料:乙醇;

所述洗脱液包括以下原料:EDTA、Tris-HCl。

2.根据权利要求1所述的一种磁珠法病毒核酸提取试剂盒,其特征在于,所述裂解液由以下物质组成:0.1M-0.5M Tris-HCl,3-5M硫氰酸胍,10-40mmEDTA,2-5% PEG-6000,1%-3%SDS,4.5-9%Triton-100,5-15%异丙醇,其余量为水。

3.根据权利要求1所述的一种磁珠法病毒核酸提取试剂盒,其特征在于,所述磁珠液,为外购磁珠,磁珠浓度为20-50mg/mL。

4.根据权利要求1所述的一种磁珠法病毒核酸提取试剂盒,其特征在于,洗涤液Ⅰ由以下物质组成:1-3M盐酸胍,0.1M-0.5M Tris-HCl。

5.根据权利要求1所述的一种磁珠法病毒核酸提取试剂盒,其特征在于,所述所述洗涤液Ⅱ、洗涤液Ⅲ由以下物质组成:60-85%乙醇。

6.根据权利要求1所述的一种磁珠法病毒核酸提取试剂盒,其特征在于,所述洗脱液由以下物质组成:1-5mmEDTA、4-10mmTris-HCl。

7.如权利要求1-6任一所述的一种磁珠法病毒核酸提取试剂盒的使用方法,其特征在于,包括以下步骤:

S1、向生物样本中加入裂解液、磁珠,混合裂解;

S2、将装有混合液的离心管置于磁力架,待磁珠完全被吸附后,弃掉上清液;

S3、加入所述洗涤液Ⅰ混匀后,将装有混合液的离心管置于磁力架,待磁珠完全被吸附后,弃掉上清液

S4、加入所述洗涤液Ⅱ混匀后,将装有混合液的离心管置于磁力架,待磁珠完全被吸附后,弃掉上清液;

S5、加入所述洗涤液Ⅲ混匀后,将装有混合液的离心管置于磁力架,待磁珠完全被吸附后,弃掉上清液;

S6、将磁珠晾干后,加入所述洗脱液,50-80℃温育洗脱后,收集核酸液并保存。

8.根据权利要求7所述的一种磁珠法病毒核酸提取试剂盒,其特征在于,所述生物样本包括唾液、咽拭子、血清、血浆、粪便。

9.根据权利要求1所述的一种磁珠法病毒核酸提取试剂盒,其特征在于,包括:试剂瓶、试剂密封帽以及密封结构;

所述试剂瓶与实际密封帽之间通过螺纹啮合,所述密封结构位于密封帽与试剂瓶的瓶口之间;

所述试剂密封帽包含:密封面板、面板塞、弹性顶柱;

所述密封面板位于面板塞上,弹性顶柱位于密封帽与密封面板之间;

还包括:环状密封盘、环形密封条、以及环形连接体;

所述环形连接体与实际密封帽的底部一体成型,且向外延伸,所述环状密封盘位于试剂瓶上,所述环形连接体的底部具有一圈的嵌入槽,环形密封条潜入到环形连接体的嵌入槽中;

所述环状密封盘上也开设有与环形密封条宽度相同的嵌入槽,所述环形密封条的底部进入到环状密封盘的嵌入槽中。

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