[发明专利]基于磁性固相萃取的脂溶性维生素的液相色谱串联质谱检测方法

权利要求书

1.一种基于磁性固相萃取的脂溶性维生素的液相色谱串联质谱检测方法，其特征在于，该方法包括以下步骤：

1)制备测试样品：

1-1)取待测的脂溶性维生素样品，向其中加入内标溶液，混匀；

1-2)取磁性固相萃取填料，进行活化处理；

1-3)将磁性固相萃取填料加入到步骤1-1)得到的溶液中，混匀得到混合液A；

1-4)通过外加磁场将混合液A中的磁性固相萃取填料转移至清洗液中，清洗；

1-5)通过外加磁场将步骤1-4)的产物中的磁性固相萃取填料转移至洗脱液中，洗脱；

1-6)通过外加磁场去除步骤1-5)的产物中的磁性固相萃取填料，将剩余的溶液稀释混匀，得到测试样品；

2)构建标准曲线：

配置不同浓度的脂溶性维生素标准液，供液相色谱串联质谱法检测，以构建待测的脂溶性维生素的标准曲线；

3)采用液相色谱串联质谱法对测试样品进行检测，结合构建的标准曲线得到测试样品中的脂溶性维生素的含量。

2.根据权利要求1所述的基于磁性固相萃取的脂溶性维生素的液相色谱串联质谱检测方法，其特征在于，所述步骤1-2)具体为：将磁性固相萃取填料加入到甲醇中进行活化，然后通过外加磁场将磁性固相萃取填料转移到水中进行填料平衡。

3.根据权利要求2所述的基于磁性固相萃取的脂溶性维生素的液相色谱串联质谱检测方法，其特征在于，其中，清洗液为甲醇的体积分数占2-70％的甲醇水溶液。

4.根据权利要求3所述的基于磁性固相萃取的脂溶性维生素的液相色谱串联质谱检测方法，其特征在于，所述步骤1-4)具体为：

1-4-1)先通过外加磁场将混合液A中的磁性固相萃取填料转移至甲醇的体积分数占2％-10％的甲醇水溶液中，混合30-120s；

1-4-2)然后再将磁性固相萃取填料转移至甲醇的体积分数占50％-70％的甲醇水溶液中，混合30-120s。

5.根据权利要求4所述的基于磁性固相萃取的脂溶性维生素的液相色谱串联质谱检测方法，其特征在于，所述洗脱液为甲醇和异丙醇的混合液，且甲醇与异丙醇的体积比为7:3～9:1。

6.根据权利要求5所述的基于磁性固相萃取的脂溶性维生素的液相色谱串联质谱检测方法，其特征在于，所述步骤1)具体包括：

1-1)取50-150μL待测的脂溶性维生素样品，向其中加入5-15μL内标溶液，500-1500转/分钟下混匀1-4min；

1-2)将0.5-6mg的磁性固相萃取填料加入到100-300μL的甲醇中进行活化，然后通过外加磁场将磁性固相萃取填料转移到200-600μL的水中进行填料平衡；

1-3)将磁性固相萃取填料加入到步骤1-1)得到的溶液中，混匀1-5min,得到混合液A；

1-4)通过外加磁场将混合液A中的磁性固相萃取填料转移至清洗液中进行清洗，具体包括：

1-4-1)先通过外加磁场将混合液A中的磁性固相萃取填料转移至300-700μL的甲醇的体积分数占2％-30％的甲醇水溶液中，混合30-120s；

1-4-2)然后再将磁性固相萃取填料转移至300-700μL的甲醇的体积分数占50％-70％的甲醇水溶液中，混合30-120s；

1-5)通过外加磁场将步骤1-4)的产物中的磁性固相萃取填料转移至50-200μL的甲醇和异丙醇的混合液中，混合30-120s；该混合液中的甲醇与异丙醇的体积比为7:3～9:1；

1-6)通过外加磁场将步骤1-5)的产物中的磁性固相萃取填料转移至步骤1-4-1)剩余的溶液中，丢弃；再向步骤1-5)的产物中剩余的溶液中加入10-100μL的高纯水稀释，500-1500转/分钟下混匀1-5min，得到测试样品。