[发明专利]一种广谱新型冠状病毒的人源抗体及其应用

说明书

本发明涉及广谱新型冠状病毒的人源抗体及其应用。利用原型株RBD与Beta毒株RBD抗原递次筛选模式，快速聚焦保守靶位，成功在体外分离到结合在RBD不同表位的能对VOC实现广谱中和的全人源抗体。其中，IMCAS‑123抗体对原型株、Alpha、Beta、Delta、Omicron亲和力达到nM水平，对高传播力Omicron突变株假病毒中和达到0.04ug/ml，是目前已有报道中唯一对Omicron三种逃逸株BA.1 BA.2 BA.3均可中和的抗体。

技术领域

本发明属于生物医药技术领域，具体涉及广谱新型冠状病毒的人源抗体及其应用。

背景技术

筛选广谱高中和活性的新冠病毒抗体，对于临床预防与治疗具有重要的现实意义。

新冠暴发后全人类通过疫苗构筑了最大规模预存免疫，然而随着病毒在人群持续传播，产生的多种突变给全球的疫苗免疫防线带来极大压力，目前Omicron出现不但跨越了多种疫苗的免疫防线，全球8个上市抗体仅存S309尚可以继续抵御，Omicron更具备了跨种传播感染小鼠等啮齿类动物的可能性。值得警惕的是，目前虽然Omicron表现出对人致病力降低，但是长远看高传播力的病毒一旦进入非人类宿主，是否免疫压力改变而带来的新型突变将不在适应人类，进而产生对人类免疫逃逸与致病力双加强的新毒株。这些科学问题都迫使科学家加快在人类免疫群体中，阐明冠状病毒交叉保护能力机制，同时对抗突变广谱抗体研究重要再一次被突出到显著位置。

然而目前研究的技术手段存在局限，全球利用新冠康复病人外周血细胞测序产出的2988抗体主要针对的是缺乏抗突变能力的免疫优势表位，鲜有针对保守表位的广谱中和能力，多个顶级期刊归纳分类文章已经关注到这个问题。从进化选择来说保守表位只有弱免疫源性才能在宿主免疫对抗中适应生存，针对保守位点免疫原性低的特点，在流感广谱抗体研究中，科学家进一步通过不同抗原的免疫聚焦、续贯免疫的策略提升“抗体的有效调动”继而获得广谱抗体，例如S309抗体是从一位感染10年的SARS康复患者中体外利用SARS2靶蛋白获得的，但是这类志愿者的不但存在极少，而且即便在SARS与COVID-19跨度上实现广谱保护，其中和谱对Covid-19新生突变的抵御能力尚缺相关性定论。，仅以Omicron来看包括S2H97、2-36、MW06等多个pan-sarbecovirus明星抗体出现效能丧失。更棘手的是，SARS2暴发事件不长，对于同一人先后感染不同VOC病毒株的机率或是对同一人交替免疫不同VOC疫苗的可能性极小，这驱使研究人员必须另辟蹊径挖掘这种弱免疫原性的广谱抗体。体外操作的抗体展示库技术的独特优势，可在应对Covid-19突变株广谱抗体的难题上发挥重要作用。本质上来说，展示库是基于体外从抗原与抗体的结合的单一角度抽象体内发生的复杂免疫反应，展示库技术与单细胞分选技术相比可以在体外快速实现不同抗原的交替差减筛选实现广谱抗体富集，其次抗体展示库技术可以实现不同人中VH/VL的全新组合从数量级水平提升了新抗体可获得性。

发明内容

本发明利用全新抗体增扩引物构建康复病人抗体噬菌体展示库，与现有技术中噬菌体展示筛选不同，本发明利用原性株RBD与Beta毒株RBD抗原递次筛选模式，快速聚焦保守靶位，成功在体外分离到多株结合在RBD不同表位的能对VOC实现广谱中和的全人源抗体。其中IMCAS-123抗体对原型株、Alpha、Beta、Delta、Omicron亲和力达到nM水平，对高传播力Omicron突变株假病毒中和达到0.04ug/ml，是目前已有报道中对Omicron逃逸株最好的中和抗体。

因此，本发明首先提供针对SARS-CoV-2的原型株、Alpha、Beta、Delta、Omicron株均有效的广谱新型冠状病毒的人源抗体或其抗原结合片段。