[发明专利]一种非淀粉榄钱总多糖及其制备方法和作为肠道益生元的应用

权利要求书

1.一种非淀粉榄钱总多糖，其特征在于：所述榄钱总多糖分子量范围为2.0～700kDa，包含4种不同分子量的多糖，其重均分子量分别为450～650、50～150、15～35、1～10kDa。

2.根据权利要求1所述的一种非淀粉榄钱总多糖，其特征在于：榄钱总多糖包括阿拉伯糖、半乳糖、半乳糖醛酸和鼠李糖，摩尔百分比分别为25％～45％、15％～35％、25％～40％、5％～15％；

还包括葡萄糖、甘露糖和葡萄糖醛酸，上述三种单糖的总摩尔百分比8％。

3.根据权利要求1所述的一种非淀粉榄钱总多糖，其特征在于：榄钱总多糖中糖含量以葡萄糖为标准品计35％～60％，糖醛酸含量以半乳糖醛酸为标准品计30％～50％，其中，蛋白质含量5％。

4.一种非淀粉榄钱总多糖的制备方法，其特征在于，步骤如下：

S1、提取：取采集的新鲜榄钱，去皮，55～65℃鼓风干燥，粉碎；取榄钱干粉置于反应釜中，提取，离心并合并所得榄钱多糖提取液；

S2、除淀粉：榄钱多糖提取液加入酶水解，水解液加入3～5倍体积的95％或无水乙醇醇沉4h以上，大容量离心机离心8～20min，离心力为3000～5000g，收集沉淀；

S3、除蛋白：榄钱粗多糖溶解后采用Sevag法除蛋白，多糖溶液与Sevag试剂(即氯仿:正丁醇(v/v)＝1:4～1:5)按体积比1:4～1:5混合，剧烈震荡20～30min，离心得到的上清液再反复除蛋白5～10次，离心力为3500～6000g，离心15～20min；

S4、除小分子杂质：反复醇沉或透析或超滤除去小分子杂质，其中反复醇沉加入乙醇终浓度为60～80％，透析或超滤选用的透析袋或超滤膜截留分子量为3000～10000Da，透析时间为48～72h；

S5、最后于50～65℃减压浓缩、冷冻干燥获得榄钱总多糖，减压浓缩的温度为50～65℃，浓缩至粘稠状。

5.根据权利要求4所述的一种非淀粉榄钱总多糖的制备方法，其特征在于：步骤S1中，提取的方法为按料液质量体积比为1:15～1:40加蒸馏水提取，提取温度为80～100℃，提取次数1～3次，提取时间为每次1.5～3h。

6.根据权利要求4所述的一种非淀粉榄钱总多糖的制备方法，其特征在于：步骤S2中，酶水解的过程为：首先加入终浓度为0.01～0.05的α-淀粉酶水解，pH为5.0～7.5，温度为45～55℃，水解2～6h；再加入终浓度为0.05％～0.25％淀粉葡糖苷酶，pH为4.0～6.0，温度为35～45℃，继续水解，直至碘液检测不变蓝。

7.根据权利要求4所述的一种非淀粉榄钱总多糖的制备方法，其特征在于：榄钱多糖提取液加入终浓度为0.01～0.03的α-淀粉酶水解，pH为6.0～7.0，温度为45～55℃，水解3～4h；再加入终浓度为0.05～0.20％淀粉葡糖苷酶，pH为4.0～5.0，温度为35～45℃，继续水解，碘液检测不变蓝；淀粉去除完全的标准为：碘液检测水解液不变蓝。

8.一种非淀粉榄钱总多糖在制备调节肠道微生物制剂、促进有益菌群生长中的应用。

9.根据权利要求8所述的应用，其特征在于：所述有益菌群包括并不限于巨球型菌属(Megasphaera)、巨单胞菌属(Megamonas)、普氏菌属(Prevotella)、光冈菌属(Mitsuokella)和双歧杆菌属(Bifidobacterium)。显著降低有害菌的相对丰度，如梭菌属(Fusobacterium)、大肠埃希菌-志贺菌属(Escherichia-Shigella)、克雷白氏杆菌属(Klebsiella)中的一种或多种。

10.一种非淀粉榄钱总多糖作为益生元在药品、食品添加剂或保健食品中的应用。