[发明专利]检测痕量雌激素、17-羟孕烯醇酮、醛固酮、硫酸脱氢表雄酮的前处理方法及检测方法

权利要求书

1.一种检测痕量雌激素、17-羟孕烯醇酮、醛固酮、硫酸脱氢表雄酮的前处理方法，其特征在于，包括以下步骤：

1)将待测样品和内标溶液混匀；

2)向步骤1)得到的混合液中加入磁珠，混匀，通过磁力架吸附磁珠，移除溶液；

3)向步骤2)得到的产物中加入体积浓度为C₁的甲醇水，混匀，通过磁力架吸附磁珠，移除甲醇水溶液；

4)向步骤3)得到的产物中加入体积浓度为C₂的甲醇水，混匀，通过磁力架吸附磁珠，移除甲醇水溶液；

5)向步骤3)得到的产物中加入洗脱液，混匀，通过磁力架吸附磁珠，移取全部洗脱液，向洗脱液中加入氨水稀释，混匀，离心，得到处理后的待测样品，取上清液作为液相色谱串联质谱法检测的测试样本；其中，所述洗脱液为含有氟化铵的甲醇与甲基叔丁基醚的混合物。

2.根据权利要求1所述的检测痕量雌激素、17-羟孕烯醇酮、醛固酮、硫酸脱氢表雄酮的前处理方法，其特征在于，C₁为1％-20％。

3.根据权利要求2所述的检测痕量雌激素、17-羟孕烯醇酮、醛固酮、硫酸脱氢表雄酮的前处理方法，其特征在于，C₂为30％-60％。

4.根据权利要求3所述的检测痕量雌激素、17-羟孕烯醇酮、醛固酮、硫酸脱氢表雄酮的前处理方法，其特征在于，氨水的质量浓度为0.05-0.2％。

5.根据权利要求4所述的检测痕量雌激素、17-羟孕烯醇酮、醛固酮、硫酸脱氢表雄酮的前处理方法，其特征在于，洗脱液中甲醇与甲基叔丁基醚的体积比为6:4～9:1，氟化铵的浓度为0.02-0.5mM。

6.根据权利要求5所述的检测痕量雌激素、17-羟孕烯醇酮、醛固酮、硫酸脱氢表雄酮的前处理方法，其特征在于，包括以下步骤：

1)将250-1000uL待测样品和5-20uL内标溶液加入到离心管中，混匀1-5min；

2)向离心管中加入2-5mg磁珠，混匀1-5min，通过磁力架吸附磁珠，移除溶液；

3)向离心管中加入250-1000uL体积浓度为1％-20％的甲醇水，混匀1-5min，通过磁力架吸附磁珠，移除甲醇水溶液；

4)向离心管中加入250-1000uL体积浓度为30％-60％的甲醇水，混匀1-5min，通过磁力架吸附磁珠，移除甲醇水溶液；

5)向离心管中加入25-100uL洗脱液，混匀1-5min，通过磁力架吸附磁珠，移取全部洗脱液，向洗脱液中加入25-100uL质量浓度为0.05-0.2％的氨水稀释，混匀1-5min，7000-28000r/min下离心2-10min，得到处理后的待测样品，作为液相色谱串联质谱法检测的测试样本；其中，所述洗脱液为甲醇与甲基叔丁基醚的体积比为6:4～9:1的混合物，且该混合物中还含有浓度为0.02-0.5mM的氟化铵。

7.根据权利要求6所述的检测痕量雌激素、17-羟孕烯醇酮、醛固酮、硫酸脱氢表雄酮的前处理方法，其特征在于，其中，C₁为5％，C₂为40％；氨水的质量浓度为0.1％。