[发明专利]一种稳定性高、在小肠定向释放的ACE抑制肽脂质体及其制备方法

权利要求书

1.一种稳定性高、在小肠定向释放的ACE抑制肽脂质体，其特征在于，ACE抑制肽脂质体外附着修饰层，所述修饰层由内到外为壳聚糖、海藻酸钠和羧乙基纤维素。

2.一种稳定性高、在小肠定向释放的ACE抑制肽脂质体的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

1)脂质体制备：

将大豆卵磷脂、胆固醇、吐温-80溶解于无水乙醇溶液，四者比例依次为6:1:1:100(m:m:v:v)，在60℃旋转蒸发形成薄膜。

向旋蒸瓶中加入含有浓度为0.1％-0.3％(g/mL)的ACE抑制肽溶液，加入量与所述无水乙醇的体积比为1:1，于60℃水合1h，得到粗脂质体混悬液。将所述粗脂质体混悬液超声处理得到纳米脂质体。

2)壳聚糖修饰：

将脂质体逐滴加入到等体积的浓度为1-2％(g/mL)的壳聚糖溶液，边加边搅拌，得到壳聚糖-ACE抑制肽脂质体，4℃储存。

3)海藻酸钠修饰：

将所述壳聚糖-ACE抑制肽脂质体溶液逐滴加入到等体积的浓度为1-2％(g/mL)的海藻酸钠溶液中，边加边搅拌，得到海藻酸钠-壳聚糖-ACE抑制肽脂质体，4℃储存。

4)羧乙基纤维素修饰：

所述海藻酸钠-壳聚糖-ACE抑制肽脂质体溶液逐滴加入到等体积的浓度为1-2％(g/mL)的羧乙基纤维素溶液中，边加边搅拌，得到三层修饰的羧乙基纤维素-海藻酸钠-壳聚糖-ACE抑制肽脂质体，4℃储存。

3.根据权利要求2所述制备方法，其特征在于，步骤1)中所述ACE抑制肽的制备方法包括：核桃脱脂粉与水按照1:7(v:v)比例混合，使用非蛋白复合酶进行第一次酶解，得脱脂核桃粕破壁悬浮液。使用碱性蛋白酶对所述脱脂核桃粕破壁悬浮液进行第二次酶解，得到核桃粕酶解液。对所述核桃粕酶解液进行超滤，5kDa分子量以下的滤出物为ACE抑制肽。

4.根据权利要求2所述制备方法，其特征在于，步骤1)中所述超声处理的条件为：超声频率20kHz，功率为500W，间隔2s循环工作；超声温度为4℃，超声时间8min。

5.根据权利要求2所述制备方法，其特征在于，步骤2)中所述壳聚糖溶液的制备方法包括：壳聚糖溶解于1％乙酸溶液中，离心取上清液，上清液过0.22μm滤膜，调节pH为5.5。

6.根据权利要求2所述制备方法，其特征在于，步骤3)中所述海藻酸钠溶液的制备方法包括：海藻酸钠溶解于蒸馏水中，离心取上清液，上清液过0.22μm滤膜，调节pH为5.5。

7.根据权利要求2所述制备方法，其特征在于，步骤4)中所述羧乙基纤维素溶液的制备方法包括：羧乙基纤维素溶解于蒸馏水中，离心取上清液，上清液过0.22μm滤膜，调节pH为5.5。

8.根据权利要求3所述ACE抑制肽制备方法，其特征在于，所述非蛋白复合酶组成为(纤维素酶、α-淀粉酶与果胶酶按照5：2：3组成)，非蛋白复合酶的添加量为脱脂粉质量的0.1％，反应温度为35℃，反应时间3h。

9.根据权利要求3所述ACE抑制肽制备方法，其特征在于，所述第二次酶解的酶解条件为：所述碱性蛋白酶加入量为脱脂粉质量的0.1-0.4％，酶解温度为50℃，pH为8.0，酶解时间4h后得到核桃粕酶解液。