[发明专利]一种利用糖基转移酶UGT76G1突变体高效生物合成莱鲍迪苷M的方法有效
| 申请号： | 202210253543.9 | 申请日： | 2022-03-15 |
| 公开（公告）号： | CN114574460B | 公开（公告）日： | 2023-07-25 |
| 发明（设计）人： | 饶义剑;郭保党;张艳;袁振波 | 申请（专利权）人： | 江南大学 |
| 主分类号： | C12N9/10 | 分类号： | C12N9/10;C12N15/54;C12N15/70;C12N1/21;C12P19/56;C12R1/19 |
| 代理公司： | 哈尔滨市阳光惠远知识产权代理有限公司 23211 | 代理人： | 林娟 |
| 地址： | 214122 江苏省无锡市滨*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 利用 糖基转移酶 ugt76g1 突变体 高效 生物 合成 莱鲍迪苷 方法 | ||
【权利要求书】：
1.一种糖基转移酶突变体，其特征在于，为氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示的蛋白质。
2.编码权利要求1所述糖基转移酶突变体的基因。
3.携带权利要求2所述基因的表达载体。
4.表达权利要求1所述糖基转移酶突变体的重组菌。
5.一种催化合成莱鲍迪苷M的方法，其特征在于，以莱鲍迪苷D为底物，利用权利要求1所述糖基转移酶突变体与蔗糖合酶偶联进行催化反应。
6.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，所述蔗糖合酶的氨基酸序列可以是任意来源的具有蔗糖合酶活性的氨基酸序列。
7.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，所述糖基转移酶突变体和蔗糖合酶的摩尔浓度比为1:1。
8.根据权利要求5~7任一项所述的方法，其特征在于，所述催化反应的条件为：1-20 mM莱鲍迪苷D、500-700 mmol/L 蔗糖、0.1-1 mM UDP、50 mM K2HPO4-KH2PO4缓冲液为反应体系，20-45℃反应20 min-24 h。
9.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，所述催化反应的第0.5 h，1 h和2 h分别添加终浓度5 mM的莱鲍迪苷D。
10.权利要求1所述糖基转移酶突变体或权利要求2所述基因或权利要求3所述表达载体或权利要求4所述重组菌或权利要求5~9任一所述方法在制备含有莱鲍迪苷M的产品中的应用。
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