[发明专利]无血清培养基间充质干细胞的培养方法及干细胞接种装置

权利要求书

1.无血清培养基培养间充质干细胞的干细胞接种装置，其特征在于，包括：底座（1），所述底座（1）上安装有支撑机构；试管（4），试管（4）可拆卸的安装于支撑机构上，试管（4）关于支撑机构呈圆周分布设置；固定块（25），固定块（25）固定于试管（4）顶部内壁，固定块（25）内插接有插管（24），插管（24）底端伸至试管（4）内侧底部；弧形气室（2），弧形气室（2）通过固定架（15）安装于支撑机构上；气囊（3），气囊（3）一端通过连接管（9）连接于弧形气室（2）上，且连接管（9）上设置有第一单向阀（12），第一单向阀（12）实现由弧形气室（2）向气囊（3）的单向导通，气囊（3）另一端通过冷却管（5）连接于插管（24）顶端，且冷却管（5）上设置有第二单向阀（13），第二单向阀（13）实现由气囊（3）向插管（24）的单向导通；所述固定架（15）一侧内壁固定有安装座（17），弧形气室（2）两端固定于安装座（17）上，安装座（17）上安装有加热棒（16），加热棒（16）位于弧形气室（2）内侧，且加热棒（16）呈与弧形气室（2）适配的弧形结构；所述冷却管（5）呈螺旋式结构；所述支撑机构包括：中心杆（14），中心杆（14）底端转动连接于底座（1）顶部内壁，中心杆（14）顶部侧壁设置有均匀圆周分布的支撑杆（18）；安装盘（21），安装盘（21）安装于支撑杆（18）远离中心杆（14）的一侧，安装盘（21）一侧外壁固定有固定夹（11），试管（4）可拆卸的安装于固定夹（11）内；所述安装盘（21）通过弹簧（22）安装于支撑杆（18）一端，弹簧（22）一侧外壁设置有两个对称的插杆（23），插杆（23）滑动连接于支撑杆（18）一端内壁；所述试管（4）顶部可拆卸的安装有胶塞（20），胶塞（20）顶端设置有拉环（19）；所述底座（1）顶部转动连接有转台（8），转台（8）上放置有培养皿（26），培养皿（26）顶部可拆卸的安装有顶盖（27）；底座（1）顶部外壁固定有支撑架（7），支撑架（7）上固定有隔膜（10），支撑架（7）和隔膜（10）位于转台（8）的外侧；支撑架（7）顶部内壁滑动连接有连接杆（6），连接杆（6）底端固定有吸盘（31），吸盘（31）可拆卸的吸附于顶盖（27）上，连接杆（6）呈空心结构，连接杆（6）顶端固定有弹性囊（30），弹性囊（30）通过连接杆（6）内部与吸盘（31）相导通。

2.根据权利要求1所述的无血清培养基培养间充质干细胞的干细胞接种装置，其特征在于，所述底座（1）顶部外壁固定有挂置架（29），挂置架（29）一侧卡接有涂布器（28）。

3.一种根据权利要求1-2任一项所述的无血清培养基培养间充质干细胞的干细胞接种装置的培养方法，其特征在于，包括如下步骤：

S1：通过使用I型胶原酶和DNase I处理间充质干细胞组织；

S2：分离得到干细胞的单细胞悬液；

S3：利用干细胞接种装置采用稀释涂布平板法进行接种；

S4：使用无血清干细胞培养基进行大规模干细胞的扩大培养；

S5：扩增结束后使用干细胞冻存保护剂进行液氮冻存。

4.根据权利要求3所述的培养方法，其特征在于，所述S3的接种方法具体为：

S31：将稀释液分别加入到试管（4）内；

S32：用移液管吸取单细胞悬液；

S33：将单细胞悬液滴入至一个试管（4）内；

S34：挤压气囊（3），使单细胞悬液与稀释液均匀混合；

S35：重复上述步骤，直至稀释到所需要的倍数；

S36：将稀释完成后的菌液滴加到装有培养基的培养皿（26）内；

S37：用杀菌处理后的涂布器（28）将菌液均匀的涂布在培养基表面。