[发明专利]无血清培养基间充质干细胞的培养方法及干细胞接种装置

说明书

本发明公开了无血清培养基间充质干细胞的培养方法及干细胞接种装置，涉及间充质干细胞培养技术领域；为了提升接种时的稀释效果；该装置包括：底座，所述底座上安装有支撑机构；试管，试管可拆卸的安装于支撑机构上，试管关于支撑机构呈圆周分布设置；该方法包括如下步骤：通过使用I型胶原酶和DNase I处理间充质干细胞组织；分离得到干细胞的单细胞悬液。本发明通过设置插管、试管等结构，能够将菌液滴入到装有稀释液的试管内时，通过挤压气囊，向试管内压入气体，达到曝气的效果，进而促进菌液与稀释液混合，从而提升稀释效果；由于设置了第一单向阀、第二单向阀等结构，有效避免了菌液被吸入插管内的情况，提升了可靠性。

技术领域

本发明涉及间充质干细胞培养技术领域，尤其涉及无血清培养基间充质干细胞的培养方法及干细胞接种装置。

背景技术

间充质干细胞是干细胞家族的重要成员，来源于发育早期的中胚层，属于多能干细胞，MSC最初在骨髓中发现，因其具有多向分化潜能、造血支持和促进干细胞植入、免疫调控和自我复制等特点而日益受到人们的关注；在间充质干细胞培养过程中，需要对间充质干细胞进行接种，多采用平板划线法和稀释涂布平板法，在进行稀释涂布平板法接种时，需要对菌液进行稀释，当吸取当前试管的菌液滴入到下一试管中进行稀释时，可能存在混合均匀度不高的情况，影响稀释效果，因此还有待改进。

经检索，中国专利申请号为CN03134579.4的专利，公开了一种菌液稀释器，其技术特征是在壳体内设有活塞，活塞上连有活塞杆，壳体及活塞杆上设有刻度，壳体内外的活塞杆上各设有一个螺标，在壳体的一侧及上部分别设有开口，并分别装有进样阀及出样阀，两阀内均设有阀芯，进样阀外装有菌液管或稀释剂管，出样阀外装有稀释液管。上述专利中的菌液稀释器存在以下不足：虽能够满足一定的使用需求，但是稀释过程中菌液混合效果欠佳，且壳体内部过于复杂，不易于加工。

发明内容

本发明的目的是为了解决现有技术中存在的缺点，而提出的无血清培养基间充质干细胞的培养方法及干细胞接种装置。

为了实现上述目的，本发明采用了如下技术方案：

无血清培养基间充质干细胞的干细胞接种装置，包括：

底座，所述底座上安装有支撑机构；

试管，试管可拆卸的安装于支撑机构上，试管关于支撑机构呈圆周分布设置；

固定块，固定块固定于试管顶部内壁，固定块内插接有插管，插管底端伸至试管内侧底部；

弧形气室，弧形气室通过固定架安装于支撑机构上；

气囊，气囊一端通过连接管连接于弧形气室上，且连接管上设置有第一单向阀，第一单向阀实现由弧形气室向气囊的单向导通，气囊另一端通过冷却管连接于插管顶端，且冷却管上设置有第二单向阀，第二单向阀实现由气囊向插管的单向导通。

优选的：所述固定架一侧内壁固定有安装座，弧形气室两端固定于安装座上，安装座上安装有加热棒，加热棒位于弧形气室内侧，且加热棒呈与弧形气室适配的弧形结构。

进一步的：所述冷却管呈螺旋式结构。

进一步优选的：所述支撑机构包括：

中心杆，中心杆底端转动连接于底座顶部内壁，中心杆顶部侧壁设置有均匀圆周分布的支撑杆；

安装盘，安装盘安装于支撑杆远离中心杆的一侧，安装盘一侧外壁固定有固定夹，试管可拆卸的安装于固定夹内。

作为本发明一种优选的：所述安装盘通过弹簧安装于支撑杆一端，弹簧一侧外壁设置有两个对称的插杆，插杆滑动连接于支撑杆一端内壁。

作为本发明进一步优选的：所述试管顶部可拆卸的安装有胶塞，胶塞顶端设置有拉环。